扬州大学广陵学院色谱法答案.ppt

（2）相对校正因子** 用一个标准，把所有组分的A较正到标准物的A上，在同一标准上进行比较计算，热导检测器常用苯作标准。 相对定量校正因子fi′定义：样品中某组分的绝对校正因子与基准物的绝对校正因子之比。 fi′ (m)表示相对质量校正因子 * 也可用相对摩尔校正因子fi(M) （2）相对校正因子 凡文献查得的校正因子都是指相对校正因子，可用fM′,fm′分别表示摩尔校正因子和质量校正因子 * 2、定量方法 （1）归一化法 试样各组分都出峰，可用归一化法定量。 把所有出峰组分的含量之和当作100%的定量分析方法称为归一化法。 若样品中有n个组分，每个组分的量分解为m1 m2…mn 各组分含量总和为m，则组分的质量为mi,质量分数Wi为 18 * 优点：简便、准确、不需标准物，不必准确称量和准确进样，操作条件稍有变化对结果影响较少。 缺点：所有组分都出峰，并测所有组分的A和fi′，如果试样中有不挥发组分或易分解物时，采用该方法将产生较大误差。 * （2）内标法 准称样品m（含mi被测组分） +准称纯物质作内标物ms 混合物→进样 被测组分 标样（内标物） * （2）内标法 * 对内标物的要求： 1）内标物应是样品中不存在的纯物质。 2）内标物与被测物的峰尽量靠近，但又能完全分开，tR相差少。 为简便起见，求定量校正因子时，常以内标物本身作标准。 fs ′=1.0 优点：定量准确，操作条件不必严格控制，与进样量无关，被测组分和内标物出峰即可，适用于微量组分的测定，应用广泛。 缺点：每次测定都要准确称量样品和内标物。增加了一个内标物，给分离带来一定困难。 （2）内标法 * （3）外标法—标准曲线法 当样品中各组分不能完全流出，又没有合适内标时，可采用此法。 将待测组分的纯物质配制不同浓度的标准系列，在相同操作条件下，定量进样，测各个峰的A或h ，绘制A—c曲线或h —c曲线。 * 在完全相同条件下，测待测样品，根据A待或h待，从曲线上查出待测组分含量。 优点：操作简单，计算方便，不用fi′。 缺点：要求准确进样，操作条件稳定。 （3）外标法—标准曲线法 A(h) c A待 cx * 气相色谱法常用定量方法：归一化法与内标法（或内标对比法） 高效液相色谱法常用外标法定量。因为HPLC进样量较GC大得多，而且六通阀进样重现性较好。 * h、W1/2、Wb、A、 K、k 有关术语 t0、tR、tR、 V0、VR、VR 、r2.1 色谱分析法导论 tR= t0(1+k) * 速率理论 H理＝Ｌ／n 理 色谱法基本理论 塔板理论 H有效＝Ｌ／n 有效 * 分离度 定量方法: 归一化法, 内标法, 外标法 * 在选择操作条件时，首先应确定欲达到的分离度，然后用以下公式进行有关计算，求得所需的塔板数和分析时间。 * 塔板理论把色谱柱比作一个分馏塔，假设柱内有n块塔板，每块塔板高度称为理论塔板高度，用H表示，在每块塔板内，试样各组分在两相中分配并达到平衡，最后，挥发度大的组分和挥发度小的组分彼此分离，挥发度大的最先从塔顶（即柱后）逸出。尽管这个理论并不完全符合色谱柱的分离过程，色谱分离和一般的分馏塔分离有着重大的差别，但是因为这个比喻形象简明，因此几十年来一直沿用。 一、塔板理论 * 一、塔板理论 对一个色谱柱来说，若色谱柱长度固定L，每块塔板高度H越小，塔板数目越多，分离的效果越好，柱效越高。塔板数用n 表示。 n =L/H 或 H=L/n H越小，n越多，分离效果越好，用 H,n 评价柱效。 由塔板理论导出n与Wb ， W 1/2 的关系。 * 有时n 大，分离效果也不好，因用tR 内含t0 ，后来改用有效塔板数。 一、塔板理论 塔板理论的成功之处，提出了计算理论塔板高度、塔板数的公式及评价柱效的方法，具有开创性，但有一定局限性。 H理＝Ｌ／n 理 H有效＝Ｌ／n 有效 * 前面已知，用塔板理论来说明色谱柱内各组分的分离过程并不合理，因为色谱柱内并没有塔板。当同一试样进入同一色谱柱，当流动相速度变化时，得到不同的色谱图。测得的 n 和 H 也不同，充分说明塔板理论不足以说明色谱柱的分离过程。 ２、速率理论—范第姆特方程 * 1956年，速率理论是荷兰学者范第姆特（VanDeomter）提出的。 速率理论吸收和保留了塔板理论的有益成果，n、H的概念。提出了影响板高的各种因素。此方程经简化后写为: 该式称为速率方程（范氏方程）。