外输泵抑制剂NMP通过调节群体感应系统和自溶抑制鲍曼不动杆菌生物被膜的机制研究(13级).pptx

大学生创新训练项目 题目：外输泵抑制剂NMP通过调节群体感应系统和自溶抑制鲍曼不动杆菌生物被膜的机制研究指导老师：王学林 于录团队成员： 王超越 丁少明 金波外输泵抑制剂NMP通过调节群体感应系统和自溶抑制鲍曼不动杆菌生物被膜的机制研究一.鲍曼不动杆菌（Ab）简介鲍曼不动杆菌为不动杆菌属中最常见的一种革兰阴性杆菌，广泛存在于自然界的水及土壤、医院环境及人体皮肤、呼吸道、消化道和泌尿生殖道中，为条件致病菌。鲍曼不动杆菌（Ab）是医院感染的重要病原菌。近年来的感染在增多，且其耐药性日益严重，已引起临床和微生物学者的严重关注。Ab主要引起呼吸道感染，也可引发败血症、泌尿系感染、继发性脑膜炎等。Ab在医院的环境中分布很广且可长期存活，对危重患者和CCU及ICU中的患者威胁很大，也将此类感染称做ICU获得性感染。国内耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌发展很快，最近又出现“全耐药”的鲍曼不动杆菌（Pan drug resistant acinetobacter baumanii），在台湾以及内地均已出现，应引起高度警惕。二.抑制鲍曼不动杆菌生物被膜的必要性随着研究和调查的深入，积累数据的增加，抗菌药物的耐药性问题已引起各国政府，相关国际组织如WHO和OIE的重视，问题已显得非常严重。当前，临床分离的鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物产生的耐药现象在国内外已极其普遍，多重耐药菌正呈逐年增加之势，由鲍曼不动杆菌引起的感染普遍存在，且耐药水平越来越高，防治日益棘手[16]，致使鲍曼不动杆菌病的发病率仍然高居不下，成为当前鲍曼不动杆菌耐药性的最大特点。而由细菌生物被膜引起的感染性疾病在临床治疗上出现了巨大的困难[17]。至今未见针对细菌生物被膜的商品化抗菌药物，所以，发现针对鲍曼不动杆菌生物被膜的抑制剂迫在眉睫。三.外输泵抑制剂NMP通过调节群体感应系统和自溶抑制鲍曼不动杆菌生物被膜的机制原理 由于外输泵表达的增强导致细菌群体感应系统和自溶的增加，而群体感应系统和自溶与细菌生物被膜形成密切相关[18]。这样，使用外输泵抑制剂抗菌能同时降低细菌生物被膜和外输泵介导的耐药性，起到一举两得的作用。同时，通过对外输泵抑制剂调节群体感应系统和自溶抑制细菌生物被膜的机制研究，进一步研究细菌的耐药性机制，对于临床应用具有重大意义[19]，采用有效的、可以临床应用的耐药抑制剂降低细菌的耐药性。本研究将阐明NMP对鲍曼不动杆菌生物被膜作用的分子机制[20]，为将NMP作为先导化合物进一步开发应用奠定基础。 鲍曼不动杆菌能将进入菌体的药物泵出体外，这种泵因需能量，故称主动流出系统或者外输泵[4]，由于这种主动外输泵的存在及它对抗菌药物选择性的特点，使鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、/view/2226751.htm表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、空肠弯曲杆菌对四环素、氟喹诺酮类、大环内酯类、氯霉素、/view/1214314.htmβ-/view/1214314.htm内酰胺类产生多重耐药[5]。外输泵抑制剂能抑制外输泵的外排功能，使鲍曼不动杆菌体内药物累积量明显增加，降低抗菌药物的最低抑菌浓度，恢复鲍曼不动杆菌对药物的敏感性，减少耐药突变频率[6]。本研究中外输泵抑制剂是N-甲基吡咯烷酮（NMP），它对RND外排泵表达的鲍曼不动杆菌有抑制作用，并且对鲍曼不动杆菌多重耐药性有部分逆转作用，尤其是高浓度的NMP作用非常明显[7]。 群体感应（Quorum-Sensing,QS）系统是指细菌能自发产生、释放一些特定的/subview/442620/442620.htm信号分子，并能感知其浓度变化，调节微生物的群体行为的调控系统[8]。它是细菌细胞根据密度变化进行基因表达调控的一种生理行为，鲍曼不动杆菌可以向周围环境释放一类可以自由进出菌体的小分子信号因子——高丝氨酸内（Homoserine Lactone，AHL），促进生物被膜的形成[9]，AHL是QS系统最典型的一类信号分子，建立有效检测AHL的方法,对于研究鲍曼不动杆菌具有非常重要的意义[10]。 细菌自溶现象是细菌在自身水解酶类的作用下细胞的消解过程，并伴随胞内物质的释放，一般分为诱导自溶和自然自溶[11]。四.细菌耐药性（Resistance） 细菌耐药性（Resistance）又称抗药性，系指细菌对于抗菌药物作用的耐受性，耐药性一旦产生，药物的化疗作用就明显下降[12]。目前，细菌耐药性越来越严重，缺少有效的、可以临床应用的耐药抑制剂。形成生物被膜（Biofilm）是细菌抵抗不利外界环境所形成的一种形式，细菌生物被膜是指细菌粘附于固体或有机腔道表面形成微菌落，并分泌细胞外多糖蛋白复合物将自身包裹其中而形成的膜状物[13]。细菌间的多糖蛋白复合物形成孔道维持细菌物质代谢。常见的形成细菌生物被膜的临床致病菌有金黄色葡