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血液常規检验标准操作规程
血液常规检验标准操作规程
?1.目的:检测分析血液中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白的数量和质量,对感染、炎症、血液系统疾病等进行辅助诊断、监测治疗效果等。
2.检测项目:红细胞计数、血红蛋白、红细胞比积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、白细胞计数、白细胞分类、血小板计数。
3.标本的采集与运送
3.1 标本类型:静脉血或手指末梢血。
3.2标本要求:标本用EDTA-K2 抗凝;
静脉血标本量应达到2ml;末梢血20μl。
3.3标本运送:室温运送,4小时内完成检测。
3.4标本拒收标准:严重溶血、凝固、血量少、无条码、无标识的血液标本不能进行检测。
4.标本的检测
仪器及试剂
4.1 仪器:深圳mindrary公司BC—5100全自动血液细胞分析仪。
试剂:由mindrary公司提供包括LH溶血剂、LEO(Ⅰ)溶血剂、LBA溶血剂、LEO(Ⅱ)溶血剂、清洁液、稀释液、探头清洁液等配套试剂。
4.1.1 检测原理
采用流式细胞技术,通过检测光学信号进行白细胞计数及白细胞分类测定;双鞘流电阻原理进行红细胞与血小板测定;HiCN-HGB法检测血红蛋白。
4.1.2 操作步骤
4.1.2.1开放-全血模式
a. 在仪器主界面点击“计数”,进入计数界面。
b. 点击计数界面“模式”,在弹出的对话框中选择“开放全血模式”。输入分析标本的试管号,点击“CBC+DIFF测量模式”。
c. 上下颠倒试管将试管内容物充分混匀,轻轻取下盖子,防止血液溅出。
d. 将试管放到采样针下,按吸样键,蜂鸣器响后移走试管,仪器自动执行样本分析。
e. 分析结束,结果显示在屏幕的分析结果区同时自动传入电脑。
4.1.2.2自动-全血模式
a. 在仪器主界面点击“计数”,进入计数界面。
b. 点击计数界面“工作模式”,在弹出的对话框中点击模式项的“自动—全血”按钮,进样模式为自动进样,血样模式为全血。点击“CBC+DIFF”测量模式。
c. 在“管架号”、“试管号”编辑框中输入起始样本的对应管架号和试管号。点击“确定”按钮,保存输入内容并返回计数界面。
c. 将分析标本试管放入对应的试管位,将试管架放入进样器右槽。
d. 点击计数界面“开始计数”,至分析结束。
e. 分析完毕,结果直接传入电脑。
4.1.3 室内质量控制
4.1.3.1 质控品:由mindrary公司提供的配套质控品。
4.1.3.2 操作方法:选择“开放—全血”模式,质控品编号9000,计数状态为绿色图标。将充分混匀的质控品放到采样针下,使采样针可吸入混匀后的质控物。
按吸样键,听到蜂鸣器响后移开质控物。质控分析结束后,质控结果自动传入电脑。
5.血细胞的显微镜检查
5.1 镜检标准
5.1.1 医生明确要求涂片镜检;
5.1.2 仪器提示有原始或幼稚细胞、变异淋巴细胞、有核红细胞等异常需镜检;
5.1.3 新生儿标本需涂片镜检;
5.1.4 WBC≥20×109/L或≤2.0×109/L;
5.1.5淋巴细胞≥45%,需做涂片镜检,1-4岁儿童且血细胞计数及他结果正常者除外;
5.1.6 单核细胞≥15%;
5.1.7 嗜酸性粒细胞≥10%;
5.1.8 嗜碱性粒细胞≥3%
5.1.9 PLT>500×109/L或<60×109/L;
5.2.0 提示有PLT聚集,需涂片镜检;
5.2 镜检步骤
5.2.1 血涂片的制备
5.2.1.1 在距载玻片一端1cm的位置滴加约5μl的抗凝血;末梢血直接用干净玻片蘸取。
5.2.1.2 用推片使血液沿其边缘展开,与载玻片30~40度角进行推片。
5.2.1.3 涂片完成后在空气中自燃晾干。
5.2.2 血涂片的染色
5.2.2.1 染色试剂:瑞氏快速染液。
5.2.2.2 染色步骤
a.干后的血涂片加上瑞氏染液,染色约1分钟。
b. 再加入等量的缓冲液,染色5~10分钟。
c. 清水冲洗后,待干后镜检。
5.2.2.3 镜检观察要求
a. 将湿片在高倍镜下观察涂片、染色是否良好,否则重新涂片染色。
b. 选择涂片体尾交界、细胞分布均匀不重叠部分进行镜检。
c. 在高倍镜下辨认细胞不清楚时,必须待玻片干后用油镜观察。
5.2.2.4 镜检观察的处理
a. 根据仪器报警提示的内容,确认镜下观察结果是否与仪器提示一致。
b. 发现原始及幼稚白细胞,则必须进行手工分类;如不能确定细胞种类,则报告异常细胞的比例。
c. 如果镜下发现有核红细胞,则必须对白细胞进行校正。
d. 如果镜下观察有血小板聚集,则必须手工冲池计数血小板;如果是EDTA﹒K2引起的血小板聚集,可用109mmol/L枸橼酸钠抗凝剂采集标本,结果需要进行换算。
e. 多发性骨髓瘤、冷球蛋白血症引起的红细胞聚集,可将血液用仪器稀释液稀释3倍,然后37℃水浴箱中1
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