数字PCR.pptx

数字PCR（Digital PCR）殷海月2150464Digital PCRDigital PCR-技术原理Digital PCR -发展历史Digital PCR-分类优点Digital PCR-应用前景Digital PCR什么是Digital PCR？数字PCR 本质上是把弱信号从噪音信号中“拎”出来。Digital PCR技术原理数字PCR一般包括两部分内容,即PCR扩增和荧光信号分析。在PCR扩增阶段,数字PCR先将样品稀释到单分子水平,再平均分配到几十至几万个单元中进行反应。 与qPCR对每个循环进行实时荧光测定的方法不同,数字PCR是在扩增结束后对每个反应单元的荧光信号进行采集,有荧光信号记为1,无荧光信号记为0,有荧光信号的反应单元中至少包含一个拷贝的。Digital PCR技术原理Digital PCR技术原理在通常情况下,数字PCR的反应单元中可能包含两个或两个以上的目标分子,这时需要采用泊松概率分布公式(Poisson distribution)进行计算上式中λ为每个反应单元中所含目标DNA分子的平均拷贝数(浓度),p为在一定的λ条件下,每个反应单元中所含k个拷贝目标DNA分子的概率。λ由样品的稀释倍数m决定,有λ=cm,其中c为样品的原始拷贝数( 浓度) 。 当k=0(不含目标DNA 分子) 时,上式可简化为p=e －λ=e －cm ,p可以看作是无荧光