chap03载体系统.ppt

?自我复制 ?酶切点 ?选择标记 ?安全性 载体的类型 依载体DNA来源 ?plasmid ?phage or virus ?黏粒 噬菌粒 ?YAC 从应用范围分 cloning vector expression vector shuttle vector or bifunctional ? §3.1 克隆载体 §3.1.1 质粒载体 1. 质粒的基本特性 质粒类型 复制控制机制 ?引物与模板结合 ?起始因子与ori结合 ③质粒的不亲和性 含相似复制子结构的不同质粒,不能共存于同一细胞 ?ColE1、pMB1→不亲和群 ?pSC101、F→彼此共存 ④质粒的转移性 接合型: F、R 非接合: ColE1 克隆载体? ⑤携带遗传标记 选择标记 ?抗药性 筛选标记 ??-互补 选择题 下列哪项不是质粒的基本特性? A. 质粒的复制为不依赖细菌CS的自主复制 B. 质粒是细菌存在必不可少的遗传物质 C. 相容性/不相容 D. 具有转移性 E. 抗药性 2. 质粒载体的构建 ori 标记 MCS 长度 (1) pBR322质粒的构建 出发质粒 ?R1 ?R6-5 ?pMB1 ?筛选 Topo TA载体 §3.1.2 噬菌体载体 ?遗传背景 ?高效感染 ?自主复制 l-DNA基因分布图