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机能学实验报告 血液凝固和影响血液凝固的因素 摘要： 【目的】研究影响血液凝固的内源性物质。通过测定某些条件下的血液凝固时间，加深理解影响血液凝固的因素。 【原理】 血液凝固的过程是由许多凝血因子参加的酶促反应。根据血液凝固过程中凝血酶原激活途径不同，可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。内源性凝血是指参与血液凝固的凝血因子全部存在于血浆中；外源性凝血是指组织因子参与下的血凝固过程。本实验采用动物颈动脉放血取血，血液几乎未与组织因子接触。因此，凝血过程主要是内源性凝血系统的作用，肺组织浸液中含丰富的组织因子，加入试管观察外源性凝血系统的作用。【结果】肝素、2%的草酸钾、石蜡、降低温度会导致血液凝固变慢甚至不凝固。棉花，肺组织浸液会大大加快血液凝固，缩短血液凝固的时间。 【结论】内源性影响血液凝固的因素—纤维蛋白，将其取出后血液不再凝固；影响血液的外源性因素通过影响血液的酶促反应来影响凝血。 关键词： 凝血因子；酶促反应；组织因子；内源性；外源性。 引言： 血液的凝固是由许多凝血因子参与的酶促反应。由血浆中可溶性的纤维蛋白原转变成不可溶的纤维蛋白，导致凝血。去除纤维蛋白，血液就不会凝固。通过调节外源性因素，可以使得血液凝固的时间改变。 1. 实验材料： 1.1 实验动物：家兔 1.2器材： 石蜡油，冰块，草酸钾，肝素，氯化钙，氨基甲酸乙酯；试管，动脉夹，动脉插管，恒温水浴，秒表。 2. 实验步骤： 2.1用200g/L 氨基甲酸乙酯（乌拉坦）按5ml/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉，将兔子仰卧固定在兔手术台上。 2.2切开颈部皮肤后（先去除颈部兔毛），分离颈外静脉，采血10ml，制备血浆和血清。 2.3分离一侧的经总动脉，头部用线结扎，向心端夹上动脉夹。用眼科剪在近结扎线处的血管壁剪一个“V”字的小口，向心方向插入动脉插管，用线结扎固定。以备取血之用。 2.4取8支试管，编号1-10。按照下图准备实验条件。 1-8号试管各加入血液2ml。9、10号小烧杯放血10ml，9号小烧杯放血时用竹签不断搅动。立即用秒表记时间，每隔15s将试管倾斜一次，观察血液是否凝固，至血液成为凝胶状记下时间。 2.6 记录时间 3. 实验结果 由图可知，1、2、4、7号试管经过一定时间都凝固，3、5、6、8-10号试管65分钟内不凝固。 4. 实验讨论 4.1 5号试管为空白对照管，起到基准时间的作用，主要是靠血液内部的内源性凝血过程是的血液凝固。 4.2 1号试管的血液凝固时间比5号试管的时间缩短。王卓强等[2]研究发现血液稀释后凝血功能与血液稀释程度相关,生理盐水占20%加快了血液凝固的进程,30%、40%稀释的凝血功能未受影响,50%稀释的血液凝固能力开始减弱,60%稀释的血液凝固能力受到严重影响。 其可能的原因：①血液稀释破坏了凝血酶与抗凝血酶的动态平衡,相较于凝血酶而言,抗凝血酶的活性更容易受到血液稀释的影响,因此产生了高凝状态②有学者则通过体内实验得出推论,认为是凝血酶原的激活增加促成了高凝状态。而30 %、40 %稀释度组的各项指标与对照组没有显著性差异,可以推测是在凝血酶原、纤维蛋白原以及血小板的浓度稀释与功能增强之间达到了一种动态平衡。当稀释度达到50 %,甚至是60 %的时候,由于某一种或是多种凝血有效成分的功能增强已不足以代偿其浓度稀释的影响,就会导致凝血功能整体性的下降,进入失代偿期。 4.3 2号试管时间比5号试管大大缩短，加入了棉花，使得血液与物体的接触面变得粗糙，加快了血液的凝固。 4.4 3号试管时间比5号试管延长，加入了石蜡油，使得血液与物体的接触面变得光滑，减慢了血液的凝固。 4.5 4号试管血液凝固时间比5号试管时间长，酶的活性随着温度的不同而不同，冰水降低了血液中凝血酶的活性，使凝血过程减慢。 4.6 6号试管血液凝固时间比5号长，因为肝素是抗凝剂，主要通过以下机制增长了血液凝固时间：①增强抗凝血酶Ⅲ与凝血酶的亲和力，加速凝血酶的失活；②抑制血小板的粘附、聚集。 4.7 7号试管的血液凝固时间比5号大大缩短，组织浸液含组织因子，组织因子FⅢ启动了外源性凝血过程，加速了血液凝固过程。 4.8 8号试管的时间比5号延长，草酸钾是抗凝剂与血液中Ca+结合生成草酸钙沉淀，减少了Ca2+，抑制了凝血过程。 4.9 9号烧杯由于内源性影响血液凝固的因素—纤维蛋白被取出后，血液应该不再凝固。而10号烧杯内的血液由于纤维蛋白的存在，血液在一段时间后应该会凝固。但实际的结果显示，10号烧杯内的血液并未凝固。可能是因为该家兔血液中血小板所含的凝血酶原激活因子较少，使得凝血速度减慢，而观察时间不够，未能看到结果。其次，室内温度较低，未开空调加温，