16-第十六次課-实验二7-21分光光度计的使用血糖的测定.docVIP

郑州铁路职业技术学院教师教案 序号 16 授课班级 药管10A1 药学10A2 药学10A1 25/4一1-2 25/4一5-6 26/4二5-6 课程名称 生物化学 教学类型 实验 复习旧课要点 血糖浓度的调节? 简述高血糖和低血糖的主要原因? 简述血糖的来源和去路? 新课内容 及要点 实验二 7-21分光光度计的使用 血糖浓度测定 实验目的 实验原理 实验用品 实验步骤 结果与分析 注意事项 授课目的 了解分光光度法的基本原理 熟悉721分光光度计的操作方法，为今后使用该仪器奠定基础。 了解氧化酶测定血糖的基本原理 掌握氧化酶法测定血糖的实验方法及临床意义。 重 点 与 难 点 重点:1.721分光光度计的基本原理 2.721分光光度计的实验步骤 3.了解氧化酶测定血糖的基本原理 难点:掌握氧化酶法测定血糖的实验方法及临床意义 课后作业 1.认真书写试验报告 2.熟练掌握721分光光度计的实验步骤 3.掌握氧化酶法测定血糖的实验方法及临床意义 实验二 721分光光度计的使用 [目的] 了解分光光度法的基本原理，熟悉721分光光度计的操作方法，为今后使用该仪器奠定基础。 [原理] 分光光度法（Spectrophotography）Ａ测和Ｃ测 1.波长可选择（400～650）nm之间 2.向比色杯加入比色液时，比色杯应保持干燥，否则会导致比色液稀释 3.所加液体的量：比色杯高度的(1/2 ～2/3) 4.比色杯光面朝向光源 5.手不能触摸比色杯的光面；有液体污染时可用软布擦干 6.比色后，应将比色液倒掉，然后用自来水、蒸馏水冲洗比色杯，倒置干燥 实验现象及结果 实验三 血糖浓度测定 【目的要求】 了解氧化酶测定血糖的基本原理，掌握氧化酶法测定血糖的实验方法及临床意义。 【实验原理】 血中的葡萄糖与酶酚混合液反应，生成有色物质，其颜色的深浅与葡萄糖的含量成正比，与同样处理的葡萄糖标准液比色，测定红色化合物的吸光度则可计算血糖浓度。整个反应可简单表示如下： 葡萄糖氧化酶 葡萄糖+O2+H2O 葡萄糖酸+H2O2 过氧化物酶 H2O2+苯酚+4-氨基安替比林 红色化合物+H2O 同样处理（酶酚混合液） 血糖（G） 有色溶液（红色） 葡萄糖标准液 有色溶液（红色） 【实验用品】 血清、葡萄糖标准液（5.55mmol/L）、72-1型分光光度计。加入物(ml） 测定管 标准管 空白管 血清 0.02 - - 标准液 - 0.02 - 蒸馏水 - - 0.02 酶工作液 3 3 3 （37℃）3、用波长500nm分光光度计进行比色，空白调节零点，读取测定管与标准管吸光度。 血糖（mmol/L）=测定管吸光度/标准管吸光度×5.55 3.89-6.11mmol/L 【思考题】 讨论血糖升高和降低的临床意义及其维持恒定的因素？ 蚅肂 郑州铁路职业技术学院教师教案 第 4 页