94实验四培养基的配制及细胞培养的条件.pptVIP

细胞工程实验动物细胞培养部分 实验一培养基的配制及细胞培养的条件 一、实验目的 掌握动物细胞培养基的配制方法，了解细胞培养的条件。 二、实验原理 细胞培养使用的培养基一般是由合成培养基和小牛血清配制而成。合成培养基有商品出售，它是根据细胞生长的需要按一定配方制成的粉状物质。其主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子和其他辅助物质。它的酸碱度和渗透压与活体内细胞外液相似。小牛血清含有一定的营养成分，更重要的是它含有细胞生长所必须的生长因子、激素、贴附因子等，这是合成培养基所无法替代的。此外它还能中和有毒物质的毒性。故一般体外培养细胞时要加入一定量的小牛血清(10％。20％)。 三、细胞生存的环境与条件 动物细胞在离体的环境下生长，必须具备以下相关的条件： 适宜的温度：体外细胞培养的温度约为36℃～37℃。 pH条件：细胞最适生长的pH为7.2～7.4。　 气体条件：培养中需要二氧化碳气。 基本营养条件：细胞培养的培养基必须供给活细胞所需要的全部盐类、氨基酸、脂肪、糖类、维生素等。细胞的培养基可分为天然培养基和合成培养基。 渗透压：培养基的物质浓度需使细胞保持等渗状态。 生长刺激因子 无菌环境 四、培养基的分类 1．天然培养基（小牛血清、胚胎液） 天然培养基是最早期人们采用的细胞培养基，直接取自于动物组织提取液或体液作为培养基，如血浆凝块、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。营