布鲁氏菌病Brucellosis_培训课件.pptVIP

动物试验 最易感动物为豚鼠，只有在1:5以下，接种两只豚鼠，腹腔或皮下接种10 ～ 20天后，心脏采血作血清凝集试验，如滴度在1:5以上，可判阳性，阴性豚鼠继续培养，4周后采血做血清凝集试验，然后扑杀，无细菌分离出，只要有一只豚鼠的滴度在1:5以上，可诊断为布鲁氏菌病。 1、血清凝集试验 操作简便、应用广泛。 a) 试管凝集试验 我国生产的布鲁氏菌凝集抗原，是按联合国世界卫生组织和粮农组织布鲁氏菌病专家委员会规定的标准标定的，其应用液（即抗原原液1:20稀释液）对国际标准布鲁氏菌阳性血清的凝集价恰为１:1000二个加号。而国际血清每毫升恰含凝集素1000个IU，我国抗原进行检验所获得的凝集价正好等于凝集素单位数。故可用凝集价来表示被检血清所含的凝集素单位。 国际兽疫局在重新修订的《国际动物卫生法规》（1982）中对进出口动物的布鲁氏菌病检疫作了新规定，即所有进出口牛，不论繁殖或饲养用，凡未接种过布鲁氏菌苗的，血清凝集价必须少于30国际单位/ml才认为是阴性。我国1952年的规定是，牛的血清凝集价1:100（即100 IU/ml）判为阳性，1:50（即50 IU/ml)判为可疑。 最近几年对城市奶牛和进出口牛的布鲁氏菌检疫则严格按照国际兽疫局（1982）规定的标准进行，即未接种过布鲁氏菌苗的牛，血清凝集价必须少于30 IU/ml才认为阴性，3 ～ 6月龄时接种过布鲁氏菌苗的牛，凝集价必须少于80 IU/ml方认为阴性。 对未出现过布鲁氏菌病的场，凝集出现阳性，则隔3 ～ 4周重检，如血清凝集（素）价未上升，则宣布该场为布鲁氏菌病检验为“－”。如重检时血清凝集价上升，除隔离、消毒外，仍作分离培养，有待于进一步确诊。 过去发生过布鲁氏菌病的场，作凝集试验，如1:100，则定为“+”，如1:50 ++，3 ～ 4周检查出阳性，则予以淘汰。 试管凝集试验，可出现非特异性反应： I）假阴性 原因: ① 检查时，动物处于潜伏期； ② 幼年畜，细菌在局部淋巴结， 活动受限制，抗体滴度低。 ③ 母畜怀孕后期，母源抗体随血 液循环至乳腺排出。 ④ 布鲁氏菌病慢性，长期刺激， 动物对抗原不敏感，故抗体滴 度不高。 II）假阳性 动物感染巴氏、土抗、弯杆菌、大肠杆菌的某些群等G－菌，与布鲁氏菌有类属抗原，抗体滴度一般在阳性及格，重检，可能下降，再检，最多维持原来水平。 b) 平板凝集试验 在平板凝集试验中，抗原0.03ml。0.08ml血清量的反应相当于试管法中的1:25血清稀释液的反应，0.04ml相当于1:50，0.02ml相当于1:100，0.01ml相当于1:200。在0.02ml量中的凝集反应判为阳性，在0.04ml中出现反应的判为可疑。 近年来我国对牛、猪的检疫，已改为按国际兽疫局规定的标准（1982）进行判定，即血清凝集价少于30国际单位/ml者判为阴性。 2、全乳环状试验 加1滴经苏木紫（或四氮唑红色）染色的环乳抗原，振荡放37℃ 水浴箱1小时，观察，如出现红色（四氮唑）蓝色（苏木紫）则为“+”。 影响因素： ① 奶酸度，酸度高，不反应。 ② 观察迟，假阳性出现。 ③ 抗原太浓，敏感度降低，太淡，敏感度又偏高。 3、补体结合试验 补体结合试验，操作复杂。 牛感染布鲁氏菌，通常在10 ～ 20天出现补体结合反应。 （1）接种19号菌苗的牛，凝集反应消失较晚（注射后9个月尚未完全消失），补体结合反应消失较早（注射后3个月变为阴性或可疑）。 （2）自然感染的牛与此不同，凝集反应与补体结合反应经常相伴出现。 4、变态反应 羊、猪：布鲁氏菌水解素，经被检动物尾根皮内注射，或肘关节皮肤较薄部位注射，24、48小时观察，有无发热，肿胀而判断。 部分病牛康复后，相当长时期内仍保持阳性变态反应，因此根据变态反应实行防制措施时，将有一部分已康复的牛被当作病牛处理。 防 制 1、清洁地区，抓好饲养管理，坚持自繁自养。引进家畜，隔离2个月，并进行2次检疫。确认健康后，方能合群。 受威胁地区，除采取上述措施，应与发病地区划分草地，水塘，定期检疫，可疑动物隔离。 2、免疫接种 ①