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(一)检验程序(二)标本采集 (三)检验方法(四)耐药性 (五)结果分析与报告 微生物学检验 肺炎克雷伯菌易产生超广谱β-内酰胺酶(ESBL),近年来文献报道我国产酶率已达30%左右,产酶株对青霉素类、第1、2、3代头孢菌素及单环β-内酰胺类抗生素均产生耐药,而仅对头霉素类、碳青霉烯类及酶抑制剂敏感。ESBL检测现已作为医院细菌室常规检测项目。 肺炎克雷伯菌检验程序 检验方法 1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定 肺炎克雷伯菌荚膜肿胀试验 返回 荚膜肿胀试验 方法: 待测菌 接种 华-佛培养基 35℃、24h 培养 取1滴培养物于载玻片上+墨汁1滴+特异性抗血清1环,加盖玻片,油镜观察 另取1滴同时作不加抗血清对照 第十章 其他革兰阴性杆菌 嗜血杆菌属 鲍特菌属 布鲁菌属 巴斯特菌属 弗朗西斯菌属 生物学特性 革兰阴性短小球杆菌 呈双球形或短丝状或多形性 无芽孢、无鞭毛 有荚膜 嗜血杆菌属 流感嗜血杆菌 微生物检验 检验程序 标本采集 抗原检测及核酸检测 分离培养与鉴定 药物敏感试验 DNA探针杂交(快速检测) 血液 脑脊液 脓汁 痰 分离培养 (巧克力琼脂) 涂片、镜检 荚膜肿胀试验(初步报告) 标记抗体检测抗原 涂片、荚膜肿胀试验(初步报告) 菌落形态、卫星现象、血清学现象 报告结果 嗜血杆菌的检验程序 增菌培养 分离培养 培养条件: 需要X、V因子 营养要求高 生长温度为35℃ 血琼脂平板培养基 巧克力琼脂培养基 菌落特征:巧克力琼脂培养基小、无色透明菌落 流感嗜血杆菌巧克力琼脂养基菌落 鉴定 培养需要X、V因子 菌落形态 卫星现象:流感嗜血杆菌当与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时,由于后者能合成较多的V因子,在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大,离金黄色葡萄球菌菌落越远的越小。 百日咳鲍特菌(B.pertussis) 副百日咳鲍特菌(B.parapertussis) 支气管鲍特菌(B.branchiseptica) 鸟鲍特菌(B.avium) 欣氏鲍特菌(B.hinzii) 霍氏鲍特菌(B.holmesii) 第二节 鲍特菌属(Bordetella) 生物学特性 革兰阴性短小杆菌 无芽孢,有荚膜 支气管鲍特菌、鸟鲍特菌有鞭毛 专性需氧,最适温度35 ℃, 最适pH6.8~7.0 百日咳鲍特菌革兰染色 百日咳鲍特菌 凝集反应 标 本 直接检查(革兰染色) DFA 抗原检出 核酸检测 分离培养 血清学诊断,ELISA等 可疑菌落 菌落观察 镜 检 生化反应 DFA 核酸检测 鲍特菌检验程序 鲍金琼脂等 分离培养与鉴定 在CCBA琼脂平版上形成光滑、有光泽、水银样的菌落 羊布鲁菌(B.melitensis又称马尔他布鲁菌) 牛布鲁菌(B.abortus又称流产布鲁菌) 猪布鲁菌(B.svis) 绵羊布鲁菌(B.ouis) 狗布鲁菌(B.canis) 森林鼠布鲁菌(B.neotomaes) 第三节 布鲁菌属(Brucella) 临床意义 传染源:病兽,以羊、牛、猪多见 传播途径:病兽的组织、尿、乳液、等通过 人体的皮肤、呼吸道、消化道进入人体 易感人群:发病以青壮年为主,从事兽医、 皮毛加工、屠宰的工人发病率较高 潜伏期:5~21日,亦可高达数月 临床表现: 症状:长期发热,多汗,关节疼痛及全身乏 力,疼痛 病理:菌在淋巴结、脾、骨髓等处繁殖,并多次入 血引起菌血症及网状内皮系统上皮样增生, 形成肉芽肿。 致病性:不产生外毒素,有较强的内毒素 可产生透明质酸酶和过氧化氢酶 侵袭力较强 迟发性超敏反应 微生物特性 革兰阴性短小球杆菌,两端钝园,偶见两极浓染, 无动力、无芽胞、无荚膜 抗原:A抗原、M抗原 需氧菌营养要求较高 需5%~10%的CO2 培养基:硫胺、烟酸、 生物素等物质 生长温度为35℃ 最适pH6.7 生长缓慢(5~7天) 培养特性: 马尔他布鲁菌血平板菌落 标本(血液、羊水、骨髓、分泌物等) 血清学诊断 凝集试验 抗人球蛋白试验 补体结合试验 分离培养(5%~10%CO2) 血琼脂、双相培养基 马铃薯培养基 动物实验(豚鼠腹腔 或皮下注射) 菌落、染色镜检 纯培养 生化反应 凝集试验 分离培养 镜检 凝集试验 布鲁菌检验程序 第四节 巴斯德菌属 巴斯德菌属(Pasteurella)属巴斯德菌科 多杀巴斯德菌(P.multocida) 嗜肺巴斯德菌(P.pneumotropic
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