新项目方法证总结-GB5750.4 - 挥发酚类 4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法、直接分光光度法.docVIP

**** 方法验证报告 方法名称:《生活饮用水标准检验方法 感官性状和物理指标》GB/T5750.4- 2006 挥发酚 4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法、直接分光光度法 项目负责人： 报告编写人： 报告日期：  目 录 1方法概要 3 1.1目的 3 1.2测定原理 3 2 仪器与化学试剂 3 2.1仪器 3 2.2试剂 3 3简要操作步骤 4 4方法确认程序 5 4.1 标准曲线的绘制： 5 4.2 方法检出限： 6 4.3方法精密度实验 6 4.4方法准确度实验： 7 5评价与验证结论 9 5.1评价 9 5.1.1空白值最低检出限评价 9 5.1.2精密度评价 9 5.1.3准确度评价 9 5.2结论 9 1方法概要 1.1目的 根据实验室的检测能力和条件以及检测检验机构资质认定评审准则的要求，确认开展挥发酚类《生活饮用水标准检验方法 感官性状和物理指标》GB/T5750.4-2006 项目的检测能力，通过试验进行分析总结，编制此方法验证报告。 1.2测定原理 在PH=10±0.2和有氧化剂铁氰化钾存在的溶液中，酚与4- 氨基安替吡啉形成红色的安替吡啉染料，用三氯甲烷萃取后比色定量。 酚的对位取代基可阻止酚与安替吡啉的反应，但羟基（—OH）、卤素、磺酰基（—SO2H） 、羧基（—COOH）、甲氧基（—OCH3）除外。因此，邻位硝基也阻止反应，间位硝基部分地阻止反应。 2 仪器与化学试剂 2.1仪器 仪器名称 规格型号 仪器 出厂编号 性能状况 （计量/校准状态、量程、灵敏度） 有效期 全玻璃蒸馏器 500mL 分液漏斗 500mL 具塞比色皿 10mL 容量瓶 250mL 分光光度计 2.2试剂 名称 生产厂家 纯度/规格 氢氧化钠 三氯甲烷 五水硫酸铜 氯化铵 氨水 ρ20=0.88g/mL 4- 氨基安替吡啉 铁氰化钾 溴化钾 溴酸钾 可溶性淀粉 水杨酸 氧化锌 硫酸溶液 1+9 苯酚 盐酸 ρ20=1.19g/mL 碘化钾 硫代硫酸钠 重铬酸钾溶液 c（1/6K2Cr2O7）=0.1000mol/L 3简要操作步骤 4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法： 取样250mL水样，置于500mL全玻璃蒸馏瓶中。以甲基橙为指示剂用硫酸溶液调PH至4.0以下，使水样由桔黄色变为橙色，加入5mL硫酸铜溶液及数粒玻璃珠，加热蒸馏。待蒸馏出总体积的90%左右，停止蒸馏。稍冷，向蒸馏瓶内加入25mL纯水，继续蒸馏，知道收集250mL馏出液为止。 注：由于酚随水蒸气挥发，速度缓慢，收集馏出液的体积应与原水体积相等。试验证明接受的馏出液体积若不与原水样相等，将影响回收率。 比色测定 将水样馏出液全部转入500mL分液漏斗中，另取酚标准使用溶液0mL，0.5mL，1.00mL，2mL，4mL，6mL，8mL和10mL，分别置于预先盛有100mL纯水的500mL分液漏斗中，最后补加纯水至250mL。 向各分液漏斗中加入2mL氨水-氯化铵缓冲液，混匀。再各加1.5mL的4-氨基安替吡啉溶液，混匀，最后加入1.50mL铁氰化钾溶液，充分混匀，准确静置10min。加入10.0mL三氯甲烷，振摇2min，静置分层。在分液漏斗颈部塞入滤纸卷将三氯甲烷萃取溶液缓缓放入干燥比色管中，用分光光度计，于460nm波长，用2cm比色皿，以三氯甲烷为参比，测量吸光度。 绘制标准曲线，从标准曲线上查处挥发酚的质量。 直接分光光度法： 水样处理同上。 吸取50mL蒸馏液（或取适量用纯水稀释至50mL）于50mL具塞比色管中。 另取50mL比色管7支，分别加入每毫升含10μg酚（以苯酚计）的标准使用液0 mL、0.5 mL，1.00 mL，3.00mL，5.00mL，7.00 mL和10.00 mL，用纯水稀释至50mL。 向水样及标准中各加入0.5mL缓冲液，摇匀。加1.0mL4-氨基安替吡啉溶液混匀。最后加入1.0mL铁氰化钾溶液，充分混匀，准确放置10min。于510nm波长，用2cm比色皿，以空白管为参比，测量吸光度。 绘制标准曲线，从标准曲线上查处挥发酚的质量。用（1）式计算。 计算