实验3 RNA的细胞化学－Brachet反应.ppt

实验三 RNA的细胞化学－Brachet反应 实验原理 细胞经甲基绿一派洛宁混合液处理后，其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应，一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料派洛宁和甲基绿具有亲和力，且这两种染料的作用有选择性，甲基绿染高聚分子的DNA呈蓝绿色，派洛宁染低聚分子的RNA呈红色。由此对细胞中的DNA和RNA进行定位、定性、和定量分析。 实验步骤 撕取洋葱内表皮3块，分别进行下面操作： 1小块， 平铺于载波片上。 1小块放于5％ 3mL三氯乙酸90℃水解15min，用70％乙醇洗片刻，平铺于载波片上。 1块放于1mL 0.1%RNA酶中处理10～15min，水洗，吸干，平铺于载波片上。(今天暂不作) 滴一滴Unna染液，染色30min。 蒸馏水洗2次，用吸水纸吸去多余的水分。 盖上盖波片，镜检。细胞质被染成浅红色，细胞核染成蓝绿色，其中核仁被染成紫红色。 作业 绘图示细胞中DNA和RNA的分布。 参考：另外一种实验方法 丙酮是固定剂，也是脱水剂，蛋白质与水结合形成水化是? 浑浊的，丙酮与蛋白质争水，减低蛋白质水化层的厚度，使片子更清晰）。 * * 3mL 3mL 3mL 3mL 2-4滴 2mL