实验410荧光光谱.ppt

荧光光谱 0910200 方啸 荧光 荧光：当化学物质从外界吸收并存储能量而进入激发态，当其从激发态向基态跃迁时，会以电磁波的形式释放能量，这称为荧光。 原子荧光：原子外层电子吸收电磁辐射跃迁到激发态，在再回到较低能级或基态时，发出一定波长的辐射，称为原子荧光。 X射线荧光：用初级X射线激发原子内层电子产生次级X射线称为X射线荧光。 分子荧光：处在基态的物质分子吸收激发光后跃迁到激发态，因转动震动等损失部分能量后，再跃迁到基态发出电磁波。 处于基态S0的分子暴露于光中会吸收能量跃迁到更高能级，如S1，处于激发态的分子通过辐射光或产生热而消激发，快速返回基态。激发态分子不产生光辐射而跃迁到更低的激发态或基态称为无辐射跃迁。返回基态而产生光辐射的跃迁，称为辐射跃迁，即荧光。 由于一部分能量没有产生辐射，所以波长处于激发波长长波边。即斯托克斯线。 若固定激发光波长，扫描发射光波长，则所得光谱称为荧光发射光谱，若固定荧光发射波长，扫描机法波茶馆，则所得光谱称为荧光激发光谱。 实验原理： 定律1：为让一种物质发射荧光，它必须吸收光和其他形式的能量。 定律2：一般来说荧光波长比激发光波长长，即存在斯托克斯线。 定律3：荧光的量子产额决定于荧光发射光子束与吸收的激发光子数的比值。 与荧光有关三个基本定律： 由于荧光物质有自己特征荧光光谱= 高选择性 荧光分析法比吸收光谱分析法灵敏度高2~3个数量级 荧光分析两个优点： 样品温度：分子的扩散，活化，内部能量转化，溶液中各种平衡 样品光化反应：较大光子能量样品长生光化反应受破坏 杂散光干扰：有散射光和拉曼散射光引起的峰，是由于溶剂分子，小颗粒或气泡的散射 溶剂影响：溶剂折射率，介电常数；影响荧光物质的化学结构 溶剂拉曼散射：溶剂有拉曼活性时，产生拉曼散射，之和激发光频率有关 样品浓度：浓度过高，荧光会被重新吸收，而且被激发的分子容易产生相互作用，导致消激发 样品的污染情况 溶解氧的影响：可产生消光现象，即猝灭 pH值的影响：弱酸弱碱与它们的分子在构型上不同，有各自特殊的in荧光量子产率和荧光光谱 影响荧光的几个主要因素： 样品池 激发单色仪 150W氙灯 发射单色仪 PM1 PM2 实验装置： 1。样品制备：5mg维生素B2放在200ml容量瓶中，加蒸馏水200ml，全部溶化后，配置10，15，20，25ug/ml各10ml，5ug/ml50ml待用。 2。激发光谱特性：选择最佳激发光，扫描发射光谱，找出发射光谱峰，发射单色仪固定在此峰，扫描激发波长，得到激发光谱 3。样品的发射光谱特性：在激发光谱峰值处，扫描发射光谱，得到荧光光谱 4。溶剂的荧光光谱特性：找出蒸馏水的荧光峰 5。荧光强度与样品浓度的关系：不同浓度的维生素B2，做出I-C曲线 6。荧光猝灭：分别滴入不同量的NaOH，测出相对荧光强度 7。狭缝宽度的影响：选择不同狭缝记录荧光发射光谱 实验内容：