基因工程制药-复习幻灯片
5’-TTGACA-3’ 5’-TATAAT-3’ ① -35 box ② -10 box(Pribnow Box) (五)影响外源基因表达效率的因素 1. 启动子的结构对表达效率的影响 RNA聚合酶 σ亚基的识别位点 (1)一致顺序 (2)-35区与-10区之间的距离 间隔为16-19 bp时,启动子最强。 (3) -35区和-10区的碱基顺序 越接近一致顺序,启动子越强。 5’-TTGACA TATAAT 一致顺序 lac trp ?PL recA tac I tac II 5’-TTTACA TATGTT 5’-TTGACA TTAACT 5’-TTGACA GATACT 5’-TTGATA TATAAT 5’-TTGACA TATAAT 5’-TTGACA TTTAAT -35 box -10 box 5’-AGGAGGU-3’ S-D序列后面的4个碱基: 如果是A(T),翻译效率最高; 如果是G(C),效率只有50%或25%。 2. 转译起始序列对表达效率的影响 (1)S-D序列 ???? AUG左侧的三个碱基也有影响。 (2)起始密码AUG ?-半乳糖苷酶的mRNA中: AUG左侧如果是UAU或CUU时,最为效; 如果是UUC、UCA或AGG时下降20倍。 多顺反子的mRNA与核糖体的结合位点有一个或几个终止
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