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第一章 染色体与DNA 第一节??? 染色体 染色体原来是指真核细胞染色后,存在于核内的着色物体。它只存在于分裂中的真核细胞内。在非分裂细胞内，它是无定形的，并弥散于核内，只是在有丝分裂前才形成确定的形状。 现在，染色体己被普遍用于指存在于病毒、细菌、真核细胞及其细胞器内所含的核酸分子。 一、真核细胞染色体的组成 组蛋白：H1、H2A、H2B、H3、H4；（见P19） 非组蛋白：HMG蛋白、DNA结合蛋白 DNA：不重复序列；中度重复序列；高度重复序列 少量的RNA； 二、染色体的一般形态结构 细胞分裂中期染色体的结构特征： 1、着丝粒（中心粒）：纺锤丝的附着部位； 2、端粒：能封闭正常染色体末端并维持染色体的稳定性； 3、染色单体： 三、染色体的超微结构 核小体是染色体包装的基本单位； 核小体的结构 每一个核小体核心包含有146bp DNA和8个组蛋白分子（2H2A，2H2B，2H3，2H4）；H1 核小体结构模型 核小体结构模型 染色体的串珠状形式与螺线管结构 DNA在每个组蛋白核心外缠绕约2圈 146bpDNA的核小体核心由54bp间隔DNA连成一条串珠状结构； 核小体螺旋形缠绕形成螺线管结构，每一周螺旋含6个核小体，因此，DNA长度缩短了6倍。 从DNA到染色体的包装压缩 DNA链 核小体 螺线管 染色单体 超螺旋 压缩比例：7*6*40*5 = 8400 四、原核生物基因组的特点P31（原核细胞DNA的特点） 1、基因组小，DNA含量低 2、一般不具核小体结构 3、结构简炼，基因组内绝大部分用于编码蛋白质 4、存在转录单元 5、重复序列少 6、有重叠基因（基因B在基因A内；两个基因部分重叠；两个基因只有一个碱基对重叠） ΦX174 的遗传 ΦX174 的遗传 第二节 DNA 的结构 DNA 的一级结构； DNA的二级结构； 变性与复性 DNA的高级结构； 一、DNA 的一级结构 概念： DNA的一级结构是指4种核苷酸的连接及其排列顺序，表示了DNA分子的化学组成。 组成：脱氧核苷酸：dAMP、dTMP、dCMP、dGMP DNA空间结构的基本特点：见书P34 碱基互补配对原则：A—T，G—C 核苷酸的组成 磷酸(phosphate)； 戊糖(pentose)； 碱基(base)：A、T、G、C 戊糖 左：核糖，存在于RNA中 右：脱氧核糖，存在于DNA中 碱 基 磷酸二酯键的形成与核苷酸链 核苷酸链间碱基配对 二、DNA 的二级结构 概念： DNA的二级结构是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。 类型： 右手螺旋：A-DNA，B-DNA 左手螺旋：Z-DNA B-DNA的模型 B-DNA和Z-DNA的比较 B-DNA的特点 1、主链：右手双螺旋结构 2、碱基配对：A — T，G — C 3、螺旋参数：0.34nm，3.4nm，10bp，4、大沟和小沟：大沟中碱基的差异很易被识别，是蛋白质结合特异DNA序列的位点。 Z-DNA的特点 1、Z-DNA是左手螺旋，每个螺旋含 12 个碱基对，比A-DNA拧得更紧； 2、双螺旋中不存在深沟(大沟)，只有浅沟(小沟)； 3、双螺旋的轴心在碱基对之外； 4、Z-DNA中磷酸二酯键的连接呈锯齿形，这是Z-DNA（zigzag DNA）名称的由来。 5、Z-DNA中鸟嘌呤碱基的第八个C原子位于双链之外。由于Z-DNA上几乎不存在易被蛋白质识别的沟，Z-DNA可能是靠鸟嘌呤碱基与化学物质发生识别反应。 三、DNA的变性和复性 （一）、双螺旋的变性； （二）、复性与杂交； （一）、双螺旋的变性 1、变性（denaturation）：也叫熔解（melting），是指DNA双螺旋的两条链完全分开成为单链的现象。 2、变性后DNA理化性质会发生变化： 3、DNA的熔点或熔解温度（Tm）：双螺旋结构失去一半时的温度。 4、影响DNA Tm值大小的因素：见下页 影响DNA Tm值大小的因素 1、DNA的均一性：均一性越高的样品，熔解过程越是发生在一个很小的温度范围内。 2、G-C的含量：G-C含量越高，Tm值越高，成正比关系。测定Tm值可计算G-C含量：（G-C）%=（Tm-69.3）× 2.44 3、介质中的离子强度：一般说，离子强度较低的介质中，Tm较低，范围也较窄。而在较高的离子强度的介质中，情况则相反。所以，DNA制品应保存在较高浓度的缓冲液或溶液中。 （二）复性与杂交 1、复性（renaturation）：变性DNA在适当条件下，两条彼此分开