酶联免疫吸附试验总结.ppt

酶联免疫吸附试验 郭建惠 简 介 1971年，一位瑞典学者和一位荷兰学者分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，称为酶联免疫吸附试验(ELISA) ELISA 就是将抗原和抗体的免疫反应和酶的催化反应相结合而建立的一种新技术。 该技术应用非常广泛，几乎所有的可溶性抗原-抗体系统均可用以检测。 ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此，也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。 基 本 原 理 先将已知的抗体或抗原结合在某种固相载体上，并保持其免疫活性。 测定时，将待检样本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应。 用洗涤的方法洗去多余的分离抗原-抗体复合物和游离成分。 然后加入酶的作用底物催化显色，进行定性或定量测定。 反 应 模 式 酶联免疫吸附试验的主要技术类型有双抗体夹心法、间接法、竞争法、捕获法、生物素-亲和素等。 1，双