1-2酶分离纯化-1要点.ppt

第五节 酶的分离纯化 酶的提取与分离纯化 将酶从细胞或发酵液中取出，再与杂质分开，获得所需的酶产品。 酶的分离纯化工作,是酶学研究的基础. 酶的纯化过程就目前而言,还是门实验科学. 酶的纯化过程与一般蛋白纯化过程相比有本身独有的特点:一是特定的一种酶在细胞中含量很少;二是酶可通过测定活力的方法加以跟踪. 一 细胞破碎（link) 二 酶的提取 (link) 三 离心分离(link) 四 过滤与膜分离(link) 五 沉淀分离(link) 六 层析分离 七 电泳分离 八 萃取分离 九 酶的结晶 十 浓缩与干燥 一 细胞破碎 大多数酶存在于细胞内，需破碎后才能提纯 细胞不同，结构不同，所用的破碎方法和条件有所不同 细胞的破碎方法： （一）机械破碎法 link （二）物理破碎法 link （三）化学破碎法 link （四）酶学破碎法 link 原理：机械运动所产生的剪力作用于细胞 1 机械捣碎法：捣碎机，10000rpm，实验、生产规模 均可 2 研磨法：研钵、石磨、球磨、细菌磨等研磨器械， 效率较低 3 匀浆法：匀浆器，用于颗粒细小的组织细胞 破碎程度高。