13基因突变与DNA损伤修复..pptVIP

4、 人类显性突变的检测 需依靠家系、出生调查，运用电泳技术、DNA标记技术，筛选各种蛋白质、酶或DNA分子的微小差异，这些微小差异是可遗传的。 5、 植物及其他动物突变体的检测 利用分离定律、转座子插入突变的检测、T-DNA插入突变的检测、RNAi技术等。 本章重点 1、重要名词： point mutation； synonymous mutation； missense mutation； nosense mutation； frameshift mutation； reverse mutations； induced mutation； mutagen； site specific mutagenesis of gene； spontaneous mutation； SOS repair。 2、点突变的分子效应。 3、简述光复活修复、切除修复、错配修复、重组修复的原理。 4、简述SOS修复 5、掌握基因突变的监测方法 2、自发突变的机制 （1）自发损伤 脱嘌呤 脱氨基 过氧化物原子团（O2-）、（H2O2）、（OH-）等有氧代谢的副产物，都是有活性的氧化剂， 它们可导致DNA的氧化损伤，T氧化后产生T－乙二醇，G氧化后产生8-氧-7-氢脱氧鸟嘌呤， 8-氧-7-氢脱氧鸟嘌呤可和A错配，导致G→T。 （2）碱基的氧化损伤 （3）DNA复制错误 （4）其他可能的机制 ①放射性同位素射线、宇宙射线、紫外线等理化因素。 ②剧烈变化的温度和极端温度。 ③特殊结构的基因，不能被损伤修复系统识别。 ④自发突变也与重复序列有关。 13.4 动态突变（自学） 13.5 DNA损伤修复机制 如果所有DNA损伤都不修复，细胞将很快死亡，这是因为致死突变的积累和依赖于DNA完整性的一些关键过程被抑制(这些过程包括复制和转录)。细胞发展了众多的机制来处理DNA损伤，这可被分为以下几类： 光复合修复（photoreaction repair or light repair） 切除修复（excision repair） 错配修复（DNA mismatch repair） 重组修复（recombinational） SOS修复（SOS repair) （1） 光复合修复 Photoreactivation repair: uses a white-light-dependent enzyme to split cyclobutane pyrimidine dimers formed by ultraviolet light. 在可见光的激活下，光修复酶结合于胸腺嘧啶二聚体处，并催化解聚为单体的过程。不同的生物体利用不同的类似酶。 （2） 切除修复 切除修复是在DNA内切酶、DNA聚合酶、DNA外切酶、DNA连接酶等共同作用下，将DNA分子受损伤的部分切除，并以完整的一条链为模板，合成切除的部分使DNA恢复正常结构的过程。 切除修复过程中，损伤的DNA链由切除酶（excinuclease）切除，此酶也是一种核酸内切酶。编码内切酶是由多个亚基组成的Uvr基因。 ① 切除修复 切口 切口 UvrA UvrB UvrC OH P DNA聚合酶Ⅲ OH P DNA连接酶 NAD+ 大肠杆菌中的UvrA可识别DNA损伤部位，引导UvrB和UvrC与其结合形成复合体。由UvrC完成对DNA 单链的切割，被切除的碱基在解链酶Ⅱ的作用下从DNA上脱离，然后由DNA聚合酶Ⅲ以互补链合成DNA，DNA连接酶封闭其缺口，从而完成DNA损伤修复。 患者不能接受太阳的紫外线，否则在皮肤暴露部位就会诱发皮肤癌，通过深入研究发现，该病患者皮肤细胞中的切除修复酶系统存在缺陷，不能对UV诱发的大量DNA损伤进行有效的修复，特别是人的抑癌基因p53发生突变就会促进癌症的发生。 着色性干皮症（xeroderma pigmentosum） ② AP 核酸酶修复途径 在DNA链上无嘌呤和无嘧啶位点叫做AP位点。AP核酸内切酶可以通过剪切AP位点上的磷酸二酯键使链断裂，进一步由外切酶、DNA polI 和连接酶进一步进行修复。 （3） 错配修复系统 错配修复系统（DNA mismatch repair system，MMR）可能在DNA复制过程中对于错配碱基的修复和由此产生的基因转换发挥一定的作用，现在已知许多生物包括人类中均存在具有一定方向性的错配修复体系。 通常错配系统倾向于修复新生链上的碱基。因此对正确母链和错配子链的区分至关重要： 亲本链上带有甲基，刚合成的子链尚未甲基化