生物药物与检验氨基酸、多肽和蛋白质类药品检验教程分析.pptVIP

第二节 多肽因子类和蛋白质类药品检验 至少应用两种以上的方法，而且是两种不同分离机理的方法来判定蛋白质的纯度才比较可靠。 常发现某一样品在凝胶过滤中是纯的，而在离子色谱中却分辨为二个组分，反之亦然。 又如一种样品用凝胶过滤法和SDS电泳证明是纯的，但这仍不充分，因为这两者机理相同。 第二节 多肽因子类和蛋白质类药品检验 三、蛋白质类药物的鉴别和检查 1、蛋白质类药物的鉴别 蛋白质类药物可根据其各自的物理、化学性质、生理作用等采用不同的方法进行鉴别。 （1）茚三酮反应 组成蛋白质的氨基酸都能与茚三酮反应生成紫色化合物，因此蛋白质也有此反应，这是蛋白质鉴别的最常用方法。 （2）福林酚反应或双缩脲反应 这两种常用来测定蛋白质的含量，但有时也用于蛋白质的鉴别。 （3）紫外吸收 由于组成蛋白质的氨基酸中，酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸在紫外区的光吸收特性，因此可利用此种特性鉴别蛋白质。 第二节 多肽因子类和蛋白质类药品检验 五、蛋白质含量测定和效价测定 1、蛋白质含量测定 蛋白质的定量可用化学方法如凯氏定氮法、双缩脲法、福林酚法、紫外光吸收法来测定；也可用染色法，如氨基黑、考马斯亮蓝测定；此外还可用荧光激发、氯胺T、放射性核素计数等灵敏度较高方法。 上述方法中凯氏定氮法、福林酚法、紫外光吸收法最为常用，它们操作简单、设备便宜。 第二节 多肽因子类和蛋白质类药品检验 （1）凯氏定氮法