生化大实验实验2研究报告.doc

生 化 大 实 验 实 验 报 告 姓 名： 王国宾 学 号：82101132325 班 级：硕士九班 实验班级：一班 专 业：农药专业 实验：多酚氧化酶(PPO)的分离提取 通过本项实验，学习和了解蛋白质的提取、分离的基本原理和方法，掌握相关的仪器设备的正确使用的方法，以及蛋白质的提取分离的系统技术。 二、实验原理： 1.蛋白质在不同浓度的盐溶液中的的溶解度不同，通过向溶液中加入适量的固体硫酸铵来调节粗提液的盐浓度从而将PPO蛋白从体系中析出。 2.大分子蛋白质不能通过透析膜。 三、材料与试剂 1.马铃薯(约每小组g) 2.试剂：0.03M磷酸缓冲液pH6.0(内含0.02M巯基乙醇，0.001MEDTA，5％甘油，1％的聚乙烯吡咯烷酮)配制时配×10倍的浓缩液1000ml；固体硫酸铵；0.03M磷酸缓冲液pH6.0(内含0.02M巯基乙醇，0.001MEDTA，0.005MgCl2)配置时配。 3.实验器械与仪器设备：试管与试管架；烧杯、玻璃搅棒；移液管、滴管等；试剂瓶；透析袋；过滤纱布；植物组织匀浆器；pH计和pH试纸；GL－20C高速冷冻离心机；DL一7A大容量低速冷冻离心机。 、操作步骤 1.粗酶提取： 马铃薯组织按1：1(W／V)比例与0.03M磷酸缓冲液pH6.0(内含0.02M巯基乙醇，0.001