new第7章蛋白质的分离纯化和表征剖析.ppt

主要介绍蛋白质的分离、纯化的一般原则和方法 分离和纯化蛋白质的各种方法主要是利用蛋白质之间各种特性的差异，包括分子的大小和形状、酸碱性质、溶解度、吸附性质和对配体分子的特异生物学亲和力 沉淀方法类别: 1、高浓度中性盐（盐析、盐溶） 2、酸碱（等电点沉淀） 3、有机溶剂沉淀 4、重金属盐类沉淀 5、生物碱试剂和某些酸类沉淀 6、加热变性沉淀 　重金属指比重大于5的金属（一般指密度大于4.5g/cm3的金属）。重金属指的是原子量大于55的金属 铜、铅、锌、铁、钴、镍、锰、镉、汞、钨、钼、金、银等 重金属阳离子可以和蛋白质中游离的羧基形成不溶性的盐 立即服用大量鲜牛奶或蛋清和豆浆,可使重金属跟牛奶、蛋清、豆浆中的蛋白质发生变性作用，从而减轻重金属对机体的危害。 水化膜被剥离 某些物理或化学因素，能够破坏蛋白质的结构状态，引起蛋白质理化性质改变并导致其生理活性丧失。这种现象称为蛋白质的变性 二、 蛋白质的分离纯化 蛋白质纯化的总目标是增加制品的纯度（purity）或比活（specific activity），以增加单位蛋白质重量中所要蛋白质的含量或生物活性（以活力单位数/克蛋白质表示）。 设法除去变性的和不要的蛋白质，并且希望所得蛋白质的产量达到最高值。 （一）透析和超过滤 图 7-6