原创力文档选修3——《现代生物科技专题》
学科指导意见
第一章 基因工程
基本要求 1.说出基因工程的含义并指出基因工程的主要内容
2.说出限制性核酸内切酶的含义及作用特点
3.说出DNA连接酶的作用
4.简述质粒的含义、特性及其在基因工程中的作用
5.简述基因工程的原理
6.描述基因工程基本步骤的几个步骤
7.举例说出基因工程在遗传育种、疾病治疗与生态环境保护方面的应用
8.说出基因治疗的基本原理
9.关注基因工程新进展
第二章 克隆技术
基本要求 1.简述植物细胞全能性的含义
2.简述植物组织培养的程序
3.说出植物克隆成功所需的条件
4.简述植物细胞培养和器官培养的方法和意义
5.简述植物细胞工程的概念、操作过程和应用
6.简述动物细胞、组织培养
7.描述细胞系及细胞株的含义
8.简述动物的克隆培养法
9.描述动物细胞全能性的表现程度，说出动物难以克隆的原因
10.简述动物细胞核移植的概念和核移植的程序
第三章 胚胎工程
基本要求 1.说出受精、卵裂、囊胚、原肠胚、三胚层等概念。
2.简述动物胚胎发育的基本过程
3.描述体外受精和胚胎体外培养。
4.简述胚胎移植和胚胎分割。
5.说出胚胎干细胞的培养和胚胎干细胞核移植
6.举例说出胚胎工程的应用。
考试说明 基因工程的诞生 Ⅰ
★基因工程的原理和技术 Ⅱ
基因工程的应用 Ⅰ 动物胚胎发育的基本过程 Ⅰ
胚胎工程及其应用 Ⅰ 植物的克隆 Ⅰ
动物的克隆 Ⅰ 生态工程的原理及主要类型 Ⅰ
生态工程在农业上的应用 Ⅰ 注：Ⅰ——知道 Ⅱ——理解
一、知识条目整理
1.基因工程 核心：构建重组DNA分子 实质：基因重组
优点：克服远缘杂交不亲和的障碍；定向改造生物性状
理论基础：DNA是生物遗传物质的发现、DNA双螺旋结构的确立、
遗传信息传递方式的认定
技术保障：限制性核酸内切酶、DNA连接酶、质粒载体的发现与应用
2.限制性核酸内切酶：识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶
从细菌中分离得到，切割的是磷酸二酯键，得到粘性末端或平末端
将一个基因从DNA分子上切割下来，需要切两处，同时产生4个粘性末端
3.DNA连接酶：将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起，形成的DNA分子称为重组DNA分子，连接的是磷酸二酯键
★几种酶的比较：限制性核酸内切酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、DNA酶、RNA酶、
解旋酶、Taq DNA连接酶
4.质粒：能够自主复制的小型双链环状DNA分子，主要存在于细菌中（酵母菌中也有），是一种特殊的遗传物质，上有控制细菌抗药性、固氮和抗生素生成等性状的基因。
★质粒作为载体的条件：①能自我复制；②具有多个限制性核酸内切酶酶切位点；
③有标记基因，以供重组DNA的鉴定和选择
★其他基因工程的载体：λ噬菌体、植物病毒、动物病毒等
5.基因工程的原理和技术
基本原理：让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定和高效地表达
步骤：
（1）获得目的基因
①目的基因的序列已知：化学合成（如人胰岛素基因）、聚合酶链式反应（PCR扩增）、反转录法
②目的基因的序列未知：从基因文库中获取（★比较基因库和基因文库）
（2）形成重组DNA分子（基因工程的核心）
通常用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA，然后用DNA连接酶将目的基因和载体DNA连接在一起，形成重组DNA分子（若用两种不同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA，只要黏性末端能够互补，经过DNA连接酶处理后，也能够形成重组DNA分子。）
（3）将重组DNA分子导入受体细胞
常用的受体细胞：大肠杆菌[人胰岛素、人生长激素、白细胞介素-2]、枯草杆菌、
酵母菌 [干扰素、乙型肝炎疫苗等蛋白质产品]
动植物细胞[生物新品种]等
目的基因导入受体细胞的方法：①农杆菌转化法——植物细胞；
②显微注射法——动物细胞；
③Ca2+处理法——大肠杆菌等原核细胞（胞吞）
（4）筛选含有目的基因的受体细胞：
①利用重组质粒上的抗性基因在选择培养基上进行筛选
②利用DNA分子杂交技术检测目的基因探针与受体细胞中DNA是否形成杂交带
（5）目的基因的表达：
①分子水平鉴定：检测目的基因是否表达出蛋白质（如抗原
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