植物显微技术教材.doc

一 前言及概述 （一）前言 显微技术的内容极为广泛，本课程仅是侧重生物显微技术（Biological microtechnique）中的植物显微技术是应用显微镜包括光学显微镜和电子显微镜来研究我们所要研究的对象，即通过一定的方法，技术，仪器进行临时制片或永久的各种制片技术，来了解其整体或个别组织，器官，细胞，染色体甚至细胞器等的形态和内部结构。 近年来由于新理论，新假设的提出，新技术，新方法及新仪器的使用，使生物显微技术的发展突飞猛进。而技术本身就是促进科学发展，提高工作效率的重要手段之一。所以，掌握一定的技术是与从事科学研究工作有着密切的关系。而技术，方法及仪器是获得科学知识的必要工具，必须经常的革新，不断地应用其它科学的新仪器，新技术，新方法为本学科服务，使之不断提高，植物显微技术当然也不例外。 本课程的目的在于要通过认识这些技术方法和手段有个初步的基础，今后遇到不生疏，有可能的话能够创造条件开展这方面的工作，为今后从事科研，教学和生产打下良好的基础。 根据我们的专业口径，科学角度，要求是不一致的，同学们毕业后所奔赴的工作岗位会有担任教师的，也会有到研究所和研究单位的，或到农场，园艺场，推广站等生产单位或到商业公司，企业开发中心等各行各业，不一定全用上这些方法和手段，不管将来在任何方面去侧重，但作为踏上工作岗位，毕业为祖国贡献力量，是有必要努力去消除知识上的缺陷，好好地打基础，大基础像金字塔一样，要先广后专，扎扎实实的推也不倒。从课程内容，技术性都比较强，为要进入显微结构领域，首先从掌握技术手段下功夫，只有过好这一关，第一手资料和数据才能拿到，才谈得上去研究它。由于内容比较多，而学时是有限的，故旨在给同学引个路子，至于如何不断开拓新的研究领域去解决具体的细节问题，将由同学们自己去探索去发挥，但这里必须指出的一点，从农业的专业口径的要求微观一定要与宏观结合，理论要结合实践，反过来理论又应该指导实践，这是不可脱节的有机联系。 （二）概述 要在自然状态下观察研究对象，如蔬菜或果树的内部结构是极为困难的，必须经过一定的技术，方法，手段来观察研究材料的内部结构，概括起来有两方面： 1.非切片法：不采用切片，能保持其组织每个单位的完整，如种子纹饰，花粉粒，气孔，毛状体，染色体等。但彼此间的相互关系（整体封固除外）就不一定看的清楚。整体封固法，涂抹压片法（压碎法，涂布法），离析法（或离解）法，透明法等均属非切片法。在电子显微镜中，扫描电镜的观察即属非切片法。 2.切片法：包埋软材料切片法，硬材料（如果树枝干，木材等）切片法均属切片法，其切制片的结果，使研究材料组织间的各种结构仍是保持着正常的相互关系，对于某一部分的细胞和组织，也能观察得很清楚。不过因为材料小且切的很薄，在一切片上往往不能看到整个组织，有时甚至一个细胞也被分开两个切片或多个切片。在电子显微镜中，透射电镜的观察，属切片法。 二 应用植物制片方法和技术时，必须注意和掌握的几个问题 实验室注意事项 为保证实验做的顺利，避免忙乱或出差错，必须严格遵守以下注意事项： 1.必须保持室内清洁，包括实验者的双手及各种器皿，用具的清洁。 2.室内各种用具，器皿，药品都需放在一定的位置，所有药品和试剂必需帖上标签，注明名称，配置日期，绝不能凭记忆和感觉去辨认，用后必须放回原处。剧毒，易燃的要注明。 3.配制所有药品，试剂都必须用清洁，干燥的器皿（事先作好准备），每种器皿用后应趁潮湿时，便放在流水中冲洗，若一时没空冲洗，也应先浸泡水中。记住及时清洗。 4.几种主要的试剂如酒精，油类，酸类，碱类等取用时，应用量筒，滴管，吸管（移液管）等分开取用。不可用同一管吸取各种试剂溶液。倾倒试剂溶液时应标签处近手心，以免药剂沾染标签，试剂溶液倒出后，不能将剩余的有倒回去。 5.装脱水溶液的器皿，一定要将并塞塞紧，以免水气进入，装挥发性药品的容器亦应紧盖，切忌“张冠李戴”错换塞盖。 6.取用酸类时，应特别小心，避免接近眼，鼻，口等。在稀释时，只准将酸慢慢倒入水中，切不可将水倒入酸中，以免产生爆炸。也要注意不要过于急剧倒入，免至过分发热，最好不断用玻璃棒搅动。 7.称量药品时，砝码要用干净镊子，称盘上应先垫称量纸（或白而光滑的纸），以便保护量具及以免药剂相混，称量用的药匙一定要分别用干净的，切不可用同一药匙取几种药品。 8.使用药品，试剂要注意节约，不要浪费，用过的废酒精、二甲苯、氯仿丙酮等可分别回收。 9.不要随便将杂物，尤其粘性物如树胶、石蜡、棉胶等倒入水槽，因这些易塞水槽。若有少量强酸或强碱要冲去，应先开自来水管立即稀释冲去，免侵蚀水槽及下水道。 10.对自己尚未掌握的仪器，切勿乱动，不要随便拆卸。 11.使用喷灯，酒精灯，电炉等，注意远离易燃药品，以保安全，用后即捡收好。 12