银屑病患者外周血整合素表达的研究.docx.docxVIP

银屑病患者血清中细胞间粘附分子的检测银屑病患者血清中细胞间粘附分子的检测中华皮肤科杂志 1998年第2期第31卷 论著摘要作者：张开明　尹兴平　杨小英　周敏单位：030009 山西省太原市中心医院近年研究发现细胞间粘附分子(ICAM-1)在银屑病发病中有一定作用［1～4］，为此，我们采用ELISA法对34例银屑病患者血清可溶性ICAM-1(sICAM-1)水平进行了测定，并对部分患者外周血单一核细胞(PBMC)ICAM-1表达进行了研究，现将结果报道如下。一、病例和方法(一)检测对象：取自1996年9月至1997年3月我科门诊及住院的银屑病患者，共34例，其中男22例，女12例；年龄14～52岁，平均36岁；病程6天至24年；其中进行期寻常型银屑病16例，静止期寻常型银屑病15例，红皮病型银屑病2例，脓疱型银屑病1例。皮损程度计算按照PASI积分法［5］，病例选择3周内(红皮病型除外)未系统或大面积外用过皮质类固醇激素、免疫抑制剂及维胺脂类等药物的患者。正常对照组33例，为门诊体检筛选出的正常人(24例)及科内健康工作者(9例)，性别及年龄尽量与检测患者相同或相近。(二)试剂：sICAM-1试剂盒为Medgenix公司产品，APAAP试剂盒为军事医学科学院基础所产品，鼠抗人ICAM-1单克隆抗体为Zymed公司产品，购自北京中山试剂公司。(三)方法：1.血清sICAM-1测定：抽静脉血2ml，分离血清，置于-40℃备用待测，所有患者及对照组均是同步测定，采用双抗体夹心ELISA法，将标准品、血清样品及空白(生理盐水)加入96孔酶板中，每孔25μl，均为复孔，每孔再加入75μl辣根过氧化物酶标记的单抗，20℃振荡 孵育2小时，弃去孔内液体，每孔加入洗涤液400μl，重复洗涤3次，之后每孔加入显色液200μl，20℃振荡 孵育30分钟，最后每孔加入50μl 1.8N H２SO４终止反应，置芬兰Labsysterms酶标仪450nm及650nm(双波长法)处测各孔吸光度(A值)，绘制标准曲线，从中求得sICAM-1含量(单位：ng/ml)。2.PBMC ICAM-1染色：患者组为15例，对照组16例，抽静脉血后密度梯度离心，常规分离PBMC，离心涂片机涂片，采用APAAP法，最后于显微镜下计数300个有核细胞，然后统计出每百个有核细胞阳性细胞数(PBMC ICAM-1+%)。3.统计学处理：采用SPSS软件包进行t检验及相关分析。二、结果1.银屑病患者血清sICAM-1水平及PBMC ICAM-1+%结果见附表。进行期血清sICAM-1水平(258.7±153.6ng/ml)附表　银屑病患者血清sICAM-1水平及PBMC ICAM-1+%结果组别sICAM-1PBMC ICAM-1+%例数±s(ng/ml)例数±s(%)银屑病组34232.2±66.21520.0±7.4对 照 组33185.0±42.11612.0±3.9t值-2.56-1.72P值-＜0.01-＜0.05与静止期(178.5±32.7ng/ml)比较，t=2.63，P＜0.01，两组间有显著性差异，静止期与对照组比较无显著性差异(P＞0.05)，2例红皮病型和1例脓疱型银屑病患者血清sICAM-1水平分别为387.6、364.5及428.3ng/ml。2.血清sICAM-1水平与PASI的关系经相关分析，r=0.56，P＜0.01，两者之间有显著的正相关关系。三、讨论ICAM-1是一种单链糖蛋白，与白细胞表面的LFA-1和Mac-1互为配体，主要分布于成纤维细胞、上皮样细胞及血管内皮细胞表面［1～3］，其主要作用是介导多种细胞间的相互粘附，在炎症和免疫反应中有一定的作用［1］，sICAM-1是细胞膜表面的ICAM-1“脱落”进入血清而形成的，正常人血清中sICAM-1水平约100～200ng/ml。Griffiths等［4］报道银屑病患者血清sICAM-1增高，我们测定的结果显示34例银屑病患者血清sICAM-1水平与对照组比较明显增高(P＜0.01)，患者组PBMC ICAM-1+%与对照组比较明显增高。由于sICAM-1的主要生物学作用是与细胞膜ICAM-1竞争性结合白细胞膜表面的相应配体［1，2］，而血管内皮细胞表面可表达ICAM-1［1～4］，所以我们推测银屑病患者血清中增高的sICAM-1可能通过血管内皮ICAM-1竞争性地结合白细胞膜上的LFA-1和Mac-1，从而对中性粒细胞与内皮细胞粘连以及通过血管壁具有抑制作用。推测sICAM-1在银屑病进行期可能具有一定的保护作用，即抑制白细胞与血管内皮细胞粘附。参　考　文　献1 冯信忠. 细胞粘附分子与皮肤病理. 国外医学皮肤性病学分册, 1997,23∶109-111.2 Veale D, Rogers