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- 2016-12-09 发布于湖北
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1.DNA粗提取和鉴定的原理 (1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,即2 mol/L NaCl可溶解DNA,0.14 mol/L NaCl可析出DNA。 (2)DNA不被蛋白酶水解: 加入嫩肉粉,可将蛋白质水解,得到DNA。 (3)DNA不溶于酒精:加入冷却的体积分数95%的酒精可析出DNA、除去杂质。 (4)DNA可被二苯胺染成蓝色,以此鉴定DNA(需沸水浴加热)。 2.DNA的粗提取和鉴定方法 (1)材料的选取:选用DNA含量相对较高的生物组织。 (2)破碎细胞 ①动物的红细胞,吸水破裂。 ②植物细胞:加入洗涤剂、食盐后研磨。 (3)除去杂质的方法 方法一:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同,通过调节_________________除去溶于和不溶于NaCl溶液中的杂质。 方法二:利用DNA对酶的耐受性,直接在滤液中加入嫩肉粉,反应10~15 min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解_______,而不会破坏_____。 NaCl溶液的浓度 DNA 蛋白质 方法三:利用DNA对高温的耐受性,将滤液放在60~75 ℃的恒温水浴箱中保温10~15 min,使_______变性沉淀而______分子还未变性。 (4)DNA的析出:向处理后的滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液(体积分数为95%),静置2~3 min,溶液中会出现白色丝状物,用玻璃棒沿一
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