DNA的复制与修复答题.pptVIP

第13章 DNA的复制与修复 中心法则 第一节 DNA复制 一、复制的特征 １ 半保留复制 semiconservative replication 两个子代分子中各有一条链来自亲代，各有另一条新合成的链的复制方式。 体现了遗传的保守性。 The Meselson-Stahl experiment  semiconservative replication of DNA 半保留复制的证据 半不连续复制的发现： 半不连续复制模式 DNA复制在细胞周期的S期mammalian cell 500-5000 bp/min  E.coli 37 ℃100000 bp/min 亲代DNA开链，复制起始点呈叉型移动， 2个叉相遇则合成终止。 复制叉：染色体参与复制的活性区域。 ①复制起始点：DNA开始复制时DNA分子的特定部位。 原核：仅含一个，约245 bp 特殊的重复序列。 真核：多个起始点。 酵母17号染色体含400个。 ②复制方向：三种机制 A：2个起点，2个叉，各合一条链（腺病毒）。 B：一个起点一个叉，同方向合成两条链（质粒DNA） C：一个起点2个叉，不同方向合成两条链，常见方式。 单双向复制取决于起点处有一个还是两个复制叉 4 复制方式 大多数以对称方式—两条链同时复制进行，也有一定时期内DNA只复制一条链的情况。 （1） 从新起始或复制叉式 （2） 置换式 又称 D 环复制 线粒体和叶绿体 DNA的复制方式 （3）共价延伸方式 ／滚环式复制 因复制产生的滚环结构形状象σ，又称σ复制。 病毒、细菌因子 希腊字母表和读法 DNA复制时的电镜图片 二 参与复制的因子 复制体 Replisome 复制叉处的酶和蛋白组成的复合体。协同合成DNA （一）参与DNA复制的物质 1 底物(substrate): dNTP（A, G, C, T）； 2 模板(template): 解开成单链的DNA母链； 3 引物(primer):小片段的DNA或RNA，常是RNA。 提供3?-OH末端使dNTP可以依次聚合； 4 单链结合蛋白（single stranded binding protein， SSB ）：稳定已经解开成两股的DNA单链，防止退火复性，保护单链的完整。 解开的双链DNA有恢复双链的倾向 单链DNA有被核酸酶水解的倾向 5 有关的酶 拓扑异构酶(DNA topoisomerase)：改变DNA拓扑性质 DNA解螺旋酶 ( helicase ) ：DnaB, 由DnaA和DnaC协助在复制的起始点（Ori C）上解开双螺旋。 引物酶（primase，DnaG）：合成复制所需的RNA引物。 DNA聚合酶（DNA-dependent DNA polymerase， DNA-pol）：活性①5??3? 的聚合活性②核酸外切酶活性. DNA连接酶(ligase)：连接不连续的DNA片段。 原核生物以NAD供能（分解为NMN和Pi）， 真核生物以ATP 供能 端粒酶（telomerase）：维持染色体端粒结构的完整。 复制可使端粒5′末端缩短，而端粒酶可外加重复单位到5′-末端上，使端粒维持一定的长度。 （二） 参与复制的酶 1 拓扑异构酶（topoisomerase） 改变DNA空间构型（拓扑学性质）的酶。 作用：DNA复制时松弛超螺旋，利于复制叉的行进及DNA合成；合成后再引向超螺旋。 机理：催化DNA链断裂、旋转、重新连接。 2 DNA解螺旋酶( helicase ) 作用：结合DNA；结合NTP；水解NTP；保持解链的极性 特点：利用ATP供能, 把DNA双链解开为单链。 DnaA蛋白：辨认E.coli上的复制起点. oriC。 DnaB (解螺旋酶)：在起始点上结合并打开双链， 活化引物酶。 DnaC蛋白：辅助解螺旋酶(DnaB)结合于起点。 3 引物酶（primase） 作用：以DNA为模板，自5’?3’合成RNA小片段, 3’末端为-OH，长短：十几到几十个核苷酸。 4 DNA聚合酶（DNA polymerase） 1956 kornberg 发现DNA聚合酶Ⅰ ……聚合酶Ⅱ、Ⅲ 机理：3’－OH对dNTP的