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发酵工业与发酵工程06发酵过程控制1-3节方案
1. 过程控制的重要性菌株特性营养要求、生长速率、呼吸强度、产物合成速率传递性能物理:n、T、Ws化学:pH、DO、浓度过程控制的意义:最佳工艺条件的优选(即最佳工艺参数 的确定)以及在发酵过程中通过过程调节达到最适水平的 控制。 2. 发酵过程控制的一般步骤 研究这些参数的变化对发酵生产水平的影响及 其机制,获取最适水平或最佳范围 3. 参数检测 代谢参数按性质可分为三类: 物理参数:温度、搅拌转速、罐压、空气流量、表观粘度、排气氧(二氧化碳)浓度等 化学参数:基质浓度(包括糖、氮、磷)、溶氧浓度、 pH、产物浓度、核酸量等 生物参数:菌丝形态、菌体浓度、菌体比生长速率、呼吸强度、摄氧率、关键酶活力等 参数按获取方式可分为两类: 直接参数:如T、pH、罐压、空气流量、搅拌转速、溶氧浓度等 间接参数:将直接参数通过公式计算获得的参数,如摄氧率γ、呼吸强度QO2、比生长速率(μ、体积溶氧系数KLa、呼吸商RQ等。 离线测量:基质(糖、脂类、无机盐等)、前体和代谢产物(抗生素、酶、有机酸、氨基酸等) 在线测量:如T、pH、DO、溶解CO2、尾气CO2、黏度、搅拌转速等 (1)C/N过低(N源过多),氨基氮(NH4+)释放; (2)中间补料中氨水或尿素等碱性物质加入过多; (3)生理碱性盐的利用; (4)碱性产物形成。 二、发酵过程中pH的变化规律 生长阶段:pH相对于起始pH有上升或下降的趋势; 生产阶段:pH趋于稳定,维持在最适于产物合成的范围; 自溶阶段:pH又上升。1. pH对微生物生长的影响 每一类菌都有其最适pH和能耐受的pH范围细菌: pH 6.3~7.5 ;霉菌和酵母菌:pH 3~6;放线菌:pH 7~8 2. pH对产物合成的影响 产物合成阶段的最适pH值和微生物生长阶段的最适pH往往不一定相同,这不仅与菌种特性有关,还取决于产物的化学特性。 e.g. 丙酮丁醇菌:生长 pH为5.5~7.0;合成pH为4.3~5.3青霉素产生菌:生长pH为6.5~7.2,合成pH为6.2~6.8链霉素产生菌:生长pH为6.3~6.9,合成pH为6.7~7.3 pH影响代谢方向: pH不同,往往引起菌体代谢过程不同,使代谢产物的质量和比例发生改变。e.g. 黑曲霉发酵:pH2~3, 柠檬酸;pH接近中性,草酸酵母菌发酵:pH4.5~5.0,酒精;pH8.0,酒精、醋酸和甘油谷氨酸发酵:pH7.0~8.0,谷氨酸;pH5.0~5.8, 谷酰胺和N-乙酰谷酰胺 影响酶的活性。 影响菌体细胞膜电荷状况,引起膜的渗透性的变化,因而影响菌体对营养的吸收和代谢产物的形成。 影响培养基某些重要的营养物质和中间代谢产物的离解,从而影响微生物对这些物质的利用。 影响代谢过程的不同,使代谢产物的质量和比例发生变化。 四、 最适pH的选择 选择pH准则:获得最大比生产速率和合适的菌体量,以获得最高产量。 来源广泛; 作用迅速可靠,消泡效率高; 不需改造现有设备; 容易实现自动控制。 罐内消泡:耙式消泡桨、旋转圆板式、气流吸入式、冲击反射板式、碟式及超声波等机械消泡装置。 罐外消泡:旋转叶片式、喷雾式、离心式及转向板式等机械消泡装置。 引起发酵液中pH上升的因素 三、 pH值对发酵过程的影响 pH对微生物生长和发酵产物合成的影响机制有: 调节好基础料的pH。 在基础料中加入维持pH的物质,如CaCO3,或具有缓冲能力的试剂,如磷酸缓冲液等。 通过补料调节pH。 五、 pH的控制方法 在发酵过程中根据糖氮消耗需要进行补料。在补料与调pH没有矛盾时采用补料调pH,如 (1)调节补糖速率,调节空气流量来调节pH (2)当NH2-N低,pH低时补氨水;当NH2-N低,pH高时补NH42SO4 当补料与调pH发生矛盾时,加酸碱调pH 改变搅拌转速或通气量,以改变溶解氧浓度,控制有机酸的积累量及其代谢速度; 改变温度,以控制微生物代谢速度; 改变罐压及通气量,降低CO2的溶解量; 改变加油或加糖量等,调节有机酸的积累量; 应急措施: 1、泡沫的产生、性质及变化 形成条件: 气-液两相共存; 表面张力大的物质存在; 第三节 泡沫的控制 一种是发酵液液面上的泡沫,气相所占的比例特别大,与液体有较明显的界限,如发酵前期的泡沫; 另一种是发酵液中的泡沫,又称流态泡沫,分散在发酵液中,比较稳定,与液体之间无明显的界限。 发酵过程中泡沫有两种类型: 发酵过程泡沫产生的原因 (1)通气搅拌的强烈程度 发酵前期培养基成分丰富,易起泡。 采用较小通气量及搅拌转速,再逐步加大。 也可在基础料中加入消泡剂。 (2)培养基配比与原料组成 前期培养基营养丰富粘度大,产泡沫多而持久。 例:在
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