细胞工程考研大题课题.docVIP

细胞工程考研问答题 细胞工程的地位，内容和技术 从某种意义上来说，基因工程是现在生物技术的核心，而细胞工程则是它的基础和公共平台，基因工程与细胞工程的结合决定着生物技术的发展。按照生物类型可以分为：动物细胞工程，植物细胞工程，微生物细胞工程，按照操作对象可以分为细胞与植物培养，细胞融合，细胞核移植，染色体操作，转基因生物等， 常用的化学消毒方法有哪些？ 化学方法：常用的是75%的酒精及1%的新吉尔灭，甲醛，环氧乙烷，氯已定，戊二醛，过氧乙酸等。物理灭菌法：紫外线，电离辐射，湿热，干热，过滤除菌等 常用培养技术 细胞培养的基本方法：悬滴培养，培养瓶培养，旋转管培养。常用的培养技术：克隆培养法。二倍体培养，同步化培养及大规模培养。 体培养细胞有哪些类型？其生长有什么区别？ 1贴壁型细胞1 成纤维型细胞：细胞贴壁后呈长梭形，圆形细胞核位于中央，生长呈放射状，旋涡状走向。细胞之间排列疏散，有较大的细胞间隙。2 上皮型细胞：细胞贴壁后呈三角形及不规则扁平的多角形，中央有扁圆形核，细胞彼次紧密连接。3 游走型细胞：细胞在支持物上分散生长，一般不连接成片形成菌落，呈活跃的游走和变形运动，速度快且方向不固定，外形不规则且不断变化。4 多形型细胞：形态上不规则，一般分胞体和胞突两部分，其中胞突为细长型，类似丝状伪足，胞体呈现多角形。2悬浮型细胞：某些细胞体外培养不需要贴附支持物上而生存空间大，能大量繁殖细胞，容易进行传代培养。 细胞系的生长过程包括哪些？每一个生长阶段有什么特征？ （1）原代培养期：也称初代培养，是指从体内取出组织接种培养到第一代的阶段，一般持续1～4周。此期细胞移动比较的活跃，可见细胞分裂，但是不旺盛。（2）传代期：原代细胞生长一定时间后，如是贴附型细胞就会连接成片而铺满瓶底，这时需要将原代细胞分开至多个培养瓶中。细胞增殖旺盛，并维持二倍体核型。（3）衰退期：此期细胞仍生存，但是不增殖或者增殖很慢，最后衰退死亡。 每代细胞的生长曲线包括那几个主要时期？各期细胞有何特点？ （1）潜伏期：此时细胞已存活具有代谢及运动功能，但是尚未增殖（2）指数生长期：又称对数期，此期细胞增殖旺盛，成倍增长，活力最佳，适用于进行实验研究。（3）停止期，又称平台期，此期细胞几经将其支持物表面沾满，细胞活力减退，已不再进行分裂增殖。 体外培养的细胞应满足哪些营养成分？ 水：所需化学成分，生存环境，营养物质都必须用水溶解才能吸收，代谢产物溶于水才能排除，维持细胞形态，调节渗透压，平衡pH。2.平衡盐溶液：组织细胞培养中常用的基本液体，维持渗透压，调节pH，供给细胞生存所需的能量和无机离子成分。3.消化液：进行原代培养时组织的取材，传代拍样中贴壁细胞的分离，都要使用消化液。4.消化酶抑制液：无血清培养时必须使用消化酶抑制液，以保护细胞免受残留的消化酶的过度消化而损坏。5.pH调整液：常用的有NaHCO3溶液和HEPES溶液。6.抗生素液：预防由于操作不慎而产生的微生物污染。7.谷氨酰胺补充液：细胞代谢过程中有重要作用，合成培养基中都要添加 培养基的基本要求 营养成分（氨基酸，单糖，维生素，其他成分），促进生长因子及激素，pH，渗透压 原代培养的过程 组织取材，组织细胞分离（机械法：离心分离，切割分离，机械分散；消化法：胰蛋白酶，胶原酶，螯合剂），培养（组织块培养，单层细胞培养，悬浮细胞培养） 什么是细胞系，细胞株？如何建立细胞系？在研究中细胞系和细胞株能发挥哪些作用？国际上有哪些著名的细胞库？ 细胞系：是由原代培养经初步纯化，获得的一种细胞为主的，能在体外长期生存的不均一的细胞群体。细胞株：细胞系经过进一步的克隆化，便得到由单一细胞组成的细胞株。初代培养，又称为原代培养，即直接从体内取出的细胞，组织和器官进行第一次的培养物。一旦进行传代培养的细胞，便不再称为初代培养，而改称为细胞系。美国的美国标准细胞库或细胞银行（ATCC）和人遗传突变细胞库（HGMR），细胞衰老细胞库（CAR）等。 细胞培养 细胞培养是动物细胞工程的重要技术基础，细胞培养包括天然培养基和合成培养基，天然培养基主要来自动物体液或从组织分离提纯制备的，营养成分高，但是成分复杂，来源有限，合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成的，细胞培养包括原代培养和传代培养，原代培养是指细胞或组织离开有机体之后的首次培养，培养到细胞生长到一定密度后就需要更新培养液，这就是细胞的传代培养， 细胞培养的方法通常有：悬滴培养法，培养瓶培养法，和旋转管培养法。动物的细胞与组织培养是从动物体内取出组织或细胞，模拟有机体内生理条件，在体外建立无菌，适温和一定营养条件等，使之生长和生存，并维持其结构和功能的技术，动物细胞和组织培养的动物细胞工程的重要技术基础，细胞融合，组织工程，胚胎工程，动物