遗传毒物与细胞死亡精选.ppt

* * 2、活性氧离子(ROS)和细胞氧化还原(redox) 许多刺激引起凋亡过程中有超氧化物和脂质过氧化物的增加，但它发生在半胱天冬酶激活之后。细胞色素。的释出也可导致线粒体ROS生成增加和ATP生成减少。 3、线粒体外膜破损 线粒体渗透性转换小孔开放将导致线粒体基质和线粒体内外膜间隙中，发生离子平衡而使内膜两侧H+梯度消失，还将导致因基质高渗而引起的线粒体容积失调，最终引起外膜破损。 * 第五节 细胞凋亡的生物学特征及其检测 * 一、细胞凋亡的形态学检测 1、光学显微镜和倒置显微镜（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。 * * 2、 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜　　一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。　　常用的DNA特异性染料有：HO 33342 (Hoechst 33342)，HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。　　Hoechst是与DNA特异结合的活性染料，储存液用蒸馏水配成1mg/ml的