细胞培养全攻略1、不要等一瓶细胞培养液完全用完，才启用第二瓶.docVIP

细胞培养全攻略 不要等一瓶细胞培养液完全用完，才启用第二瓶。最好第一瓶还剩一点时，就启用第二瓶，如果第二瓶培养液有问题（如被污染），不致于毁掉你所有的细胞。2、不要指望让自己的所有细胞“步调一致”，即在准备用来做实验的几瓶细胞较一致的同时，使另几瓶细胞量有多有少，以确保细胞不致于同时长过了死掉，或同时因瓶内细胞太少没长起来。3、有时候经验上的“多少瓶细胞长多满能接种多少块培养板”，比细胞计算板来得更可靠，毕竟用细胞计算板计算其实夹杂了太多主观因素。4、有时遇上长假，又不想把细胞都冻起来（毕竟重新复苏的细胞状态还是要差点），可以把吹打过细胞的吸管的头在新培养瓶的培养液中沾一下，继续培养，一般能保持一个星期以上没有问题。各人可以根据自己的细胞摸索一下。5、关于胰酶消化贴壁细胞，其活力主要在于浓度。所以我消化细胞时喜欢在倒掉旧培养液后将培养瓶立起来几十秒，吸去流下的培养液，吸极少量胰酶润一润，再吸走，再吸入一点点胰酶消化，轻轻摆动培养瓶，让胰酶浸润到所有的细胞。我试过多种细胞，一般这样消化个一两分钟，就可以吹打了。一般1ml胰酶能消化2～3瓶细胞没问题，而且效果强于倒掉旧培养液后直接滴入1ml胰酶消化10分钟（毕竟倒掉旧培养液后瓶内不止残留1ml旧培养液，再入1ml胰酶，其浓度只有原来的一半）。这是我看到别人的经验后试了下，改了下，不全是我自己的。 1、细胞是有灵性的，养细胞的过