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当底物浓度高达一定程度 反应速度不再增加，达到最大速度；反应为零级反应。 [S] V0 Vmax * 中间产物 酶促反应模式——中间产物学说 米-曼氏方程式 E + S k1 k-1 k2 ES E + P k-21913年Michaelis和Menten提出反应速度与底物浓度关系的数学方程式，即米－曼氏方程式，简称米氏方程式。 V0 Vmax[S] Km + [S] ＝ ─── [S]：底物浓度 V0：不同[S]时的反应初速度 Vmax：最大反应速度 (maximum velocity) Km：米氏常数 (Michaelis constant) * 米氏方程式推导基于两个假设： E与S形成ES复合物的反应是快速平衡反应，而ES分解为E及P的反应为慢反应，反应速度取决于慢反应即 V0＝k2[ES] (1) S的总浓度远远大于E的总浓度，因此在反应的初始阶段，S的浓度可认为不变即[S]＝[St]。E + S k1 k-1 k2 ES E + P 反应早期产物的浓度[P]忽略不计，总反应简化为： * 稳态：ES的生成速度与分解速度相等，即 [ES]恒定 k1 ([Et]－[ES]) [S]＝k-1 [ES] + k2 [ES] k-1 + k2 ＝ Km （米氏常数） k1 令： 则(2)变为: ([Et]－[ES]) [S] ＝Km [ES