医学细胞生物学实验大纲探讨.doc

实验一 显微镜的结构及使用方法 一、实验目的 1. 学习普通台式显微镜的结构、各部分的功能和使用方法。. 学习并掌握油镜的原理和使用方法。光学显微镜(microscope)，简称光镜，是生物医学研究及临床工作中常用的仪器，每个学生都必须熟悉它的结构和性能，掌握其使用方法。 光学显微镜的主要构造 显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分 () 。 (1) 机械部分 ①镜座：亦称镜脚，是显微镜的基座，用以支持整个显微镜。 ②镜柱：是镜座向上直立的短柱，用以支持其他部分。 ③镜臂：是镜柱向上弯曲的部分，适于手握。有些显微镜镜柱与镜臂之间有倾斜关节。 ④镜筒：连在镜臂前方的镜筒部分，一般长度为16 cm 。有直筒和斜筒两种，前者镜筒上下可调节，后者镜筒是固定的⑤调节器：是装在镜臂上的大小两种螺旋，转动时可使镜台升降或使镜筒上下移动以调节焦距。 粗调节器 ( 粗螺旋 ) 转动时可使镜台或镜筒在垂直方向以较快速度和较大距离进行上下升降，调节物镜与标本的距离。通常在低倍镜下，先用粗调节器找到物像。 细调节器 ( 细螺旋 ) 形状较小，通常在粗调节器的下方或外侧，转动时可使镜台或镜筒缓慢地上下移动，以精细调节焦距，得到清晰的物像。 ⑥旋转器 ( 镜头转换器 ) ：装在镜筒的下端，呈盘状，下面有3～4 个物镜孔供装置不同放⑦载物台 ( 镜台 ) ：用以放玻片样本，中间有一通光圆孔，称为镜台孔，由此孔可透入集光器传入的光线。 ⑧标本移动器：装于载物台上，用于前后左右移动玻片标本。移动器上有标尺，可以测定标本大小。 (2) 照明部分 ①显微镜采用电光源，使用时接上电源，在打开电源前，光照亮度旋至最小位置，然后打开电源，旋转亮度旋扭调节光照强度至适宜为止。关闭电源前，应先将光照亮度旋至最小位置。 ②聚光器 ( 又名集光器，condenser) ：位于载物台下方的聚光器架上，由聚光镜和虹彩光阑组成。 聚光镜由一片或数片透镜组成，其作用相当于一凸透镜，起会聚光线的作用，一般可通过装在镜柱旁的聚光器调节螺旋的转动而上下移动，上升时视野中光亮度增加，下降时光亮度变弱虹彩光阑 ( 又名光圈，diaphragm) 在聚光镜下方，由十几张活动的金属薄片组成。其外侧伸出一柄，推动此柄可随意调节开孔的大小，以调节光量。(3) 光学部分 ①目镜 (ocular) ：位于镜筒上方，常用的有5X6X，8X，10X，12X，15X，数字越大放大倍率越高，可根据需要挑选使用。一般装在镜筒上的是10 ×目镜。 ②物镜 (objective) ：装在镜筒下端的旋转器上，一般有3～4个物镜。其中最短的刻有“4 X”或“10X”符号的为低倍镜，较长的刻有40X”符号的为高倍镜；最长的刻有“100X ”符号的为油镜。 在物镜上，还有镜口率 (NA) 的标志。镜口率反映该镜头分辨力的大小，其数字越大，表示分辨力越高。物镜的工作距离是指显微镜处于工作状态 ( 物像调节清楚 ) 时，物镜的下表面与盖玻片 ( 盖玻片的厚度一般为17 mm ) 上表面之问的距离。物镜的放大倍数愈大，它的工作距离愈小。显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积，如物镜为10X，目镜为10X，其放大倍数就为l00。2．光学显微镜的使用方法 (1) 低倍镜的使用方法 ①检查：用右手握镜臂，从镜箱中将显微镜取出，左手托镜座，平稳地放到实验桌上。使用前应先检查一下显微镜各部分结构是否完整，如发现有缺损或性能不良，要立即报告教师，请求处理。 ②准备：将显微镜放于自己座位面前实验桌上稍偏左侧，镜台向前镜筒向后，旋转粗调节器使镜台远离物镜，旋转物镜转换器，使低倍镜对准镜台孔，这时可听到转换器边上固定扣碰上而发出的声音，或手上感到一种阻力，说明物镜的光轴已正对镜筒的中心。 ③对光：打开光圈，将聚光器上升。双眼同时张开向目镜内观察，打开电源，调节光照亮度旋钮，直到光亮度最适宜为止。 ④置片和调整焦距：将玻片标本置于镜台上，注意使有盖玻片的一面朝上，利用标本移动器将玻片夹住，然后将玻片稍加调节，使标本对准镜台孔。从侧面注视低倍镜，转动粗调节器，使镜台慢慢上升至处为止，再以眼自目镜中观察，左手转动粗调节器使镜台徐徐下降，直到视野中出现标本的物像为止；再转动细调节器，使镜台微微上下，调节距离，使物像清晰。 (2) 高倍镜的使用方法 ①依上法先用低倍镜找到物像后，将欲观察的标本部分移到视野中央。 ②眼睛从侧面注视物镜，用手转动物镜转换器，使高倍物镜对准标本如果操作正确，此时物镜与标本之间距离正好，不会碰到。 ③眼睛向目镜内看，同时只需轻轻转动细调节器使镜台微微升降，即得到清晰的物像。 (3) 油镜的使用方法 ①同高倍镜的使用方法 ②在玻片标本上需