实验二、重金属污染对植物叶绿素含量.pptVIP

实验目的 掌握叶绿素含量的测定 了解重金属污染对叶绿素含量的影响 了解在重金属胁迫条件下的变化趋势 实验原理 植物叶绿素分叶绿素a和叶绿素b，其含量的高低是反映植物光合作用能力的一个重要指标 叶绿素含量的变化可以反映污染对植物光合作用的影响 实验仪器与材料 仪器：研钵、滤纸、漏斗、5 mL移液管、分光光度计等 材料：小麦 试剂：丙酮（80%） 、石英砂、氯化铬（Cd 2+）系列溶液（0、5、10、25、50mg/L） 实验步骤1：实验材料培养 将大小比例均匀的种子用蒸馏水浸泡、吸胀后，移入铺有2层滤纸的培养皿中，置入光照培养箱中培养（22 ℃ ～25℃） 实验步骤2：分组染毒处理 在种子长出2片真叶后，分别用5个不同浓度的重金属氯化铬溶液处理 每组3个平行处理 实验步骤2：分组染毒处理 每天用蒸馏水冲洗1次，再用原组重金属溶液培养 培养1周后，即可用 实验步骤3：叶片中叶绿素提取 取新鲜植物叶片0.1g (5株等长植物) 剪碎，放入研钵中，加入80%丙酮2.5mL和少量(3 ～ 4粒）石英砂研成糊状，再加3mL 80%的丙酮,继续研磨至组织变白 实验步骤3：叶片中叶绿素提取 在暗处静置3 ～ 5min后，用一层滤纸过滤到30mL烧杯中 用滴管吸取80%丙酮将研钵和滤纸周围洗脱色素 待滤纸和残渣全部变白后，用80%丙酮定容至20mL 实验步骤4：测定吸光度 先用少量色素提取液清洗比色皿2 ～ 3次，然后将色素提取液倒入比色皿中 80%丙酮作空白对照 在波长分别为663nm、645nm条件下测定提取液的吸光度。如果浓度较高，适当稀释后比色定量。 计算叶绿素含量 叶绿素a和b及总叶绿素的浓度分别为： Ca、Cb和CT，可根据下式计算： Ca=12.7A663-2.69A645 Cb=22.9A645-4.68A663 CT=8.02A663+20.21A645 式中：A663、A645分别为提取液在波长663nm、645nm下的吸光度。 数据处理与实验结果分析： 每个处理组的平行测定结果用平均数±标准误（￣ ±SE）表示，用One-Way ANOVA分析不同处理间的差异性。可Excel做图，展示实验结果并分析。 X Let’s do it!