金黄葡萄球菌检验.ppt

食品中金黄色葡萄球菌检验 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气，土壤，水及人和动物的排泄物中都可找到。因而，食品受其污染的机会很多。近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌素引起的食物中毒占整个世界性食物中毒的33%，加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。 经典案例 广东牛奶受金黄色葡萄球菌污染 金黄色葡萄球菌的流行病学有如下特点：多见于春夏季；中毒食品以奶，肉，蛋，鱼，剩饭，油煎蛋，糯米糕及凉粉最为常见。上呼吸道感染者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常为污染源。 一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品：食品加工人员，炊事员或销售员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓，对肉体其他部位的污染等。 金黄色葡萄球菌毒素 如何预防？ ① 防止金黄色葡萄球菌污染食品 防止带菌人群对各种食物的污染：定期对生产加工人员进行健康检查，患局部化脓性感染（如 疥疮 、手指化脓等）、上呼吸道感染（如 鼻窦炎 、化脓性肺炎、口腔疾病等）的人员要暂时停止其工作或调换岗位。 对肉制品加工厂，患局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位，经高温或其他适当方式处理后进行加工生产。 ② 防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成 应在低温和通风良好的条件下贮藏食物，以防肠毒素形成；在气温高的春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过6小时，并且食用前要彻底加热。 有金黄色葡萄球 菌感染者，可选用：红霉素、新型青霉素、 庆大霉素 、 万古霉素 或先锋霉素Ⅵ治疗。 一、生物学特性 二、检验所需器材 金黄色葡萄球菌检验的器材主要有胰酪胨大豆汤，7.5%氯化钠肉汤，血琼脂平板， Baird-Parker琼脂平板，肉浸夜肉汤，灭菌盐水，兔血浆及显微镜，培养箱，离心机1ml和10ml灭菌吸管，灭菌试管，灭菌平皿，均质器，载玻片，L形布棒，酒精，接种环等。 三、检验程序 检样 25g(ml)+225ml灭菌生理盐水 四、操作方法 1.增菌培养法 （1）检样处理 无菌操作称取25g检样，加入到盛有225ml灭菌生理盐水的灭菌溶液内，制成1：10检样混悬液。 （2）增菌培养 吸取5ml的1：10检样混悬液，接种于50ml的7.5%氯化钠肉汤或胰酪胨大豆汤培养基内，置36℃培养箱内培养24小时。 （3）分离培养 用接种环从有细菌生长的增菌培养基中取菌一环，划线接种于血平板和Baird-Parker平板， 36℃培养24小时。 （4）观察菌落形态 观察血平板和Baird-Parker平板上可疑食品中金黄色葡萄球菌形态。 （5）革兰氏染色 挑取血平板和Baird-Parker平板可疑食品中金黄色葡萄球菌落进行革兰氏染色 镜检。 （6）血浆凝固酶试验 挑取可疑食品中金黄色葡萄球菌接种到葡萄糖肉汤培养基内， 36℃培养24小时。吸取1：4新鲜兔血浆0.5ml,放入小试管中，再加培养24小时的金黄色葡萄球菌肉浸液培养物0.5ml,震荡摇匀，放36℃温箱内，每30min观察一次，观察6h，呈凝块则为阳性结果。 2。直接计数方法 （1）检样处理 同“增菌培养法”。 （2）样品稀释 吸取上述1：10混悬液，进行10倍递增稀释。 （3）分离接种 根据样品污染情况，选择适宜浓度的稀释液1ml，分别加入三个Baird-Parker平板，每个平板接种量分别为0.3，0.3，0.4ml.然后用灭菌L棒涂布整个平板。如水分不易吸收，可将平板在36℃温箱1小时，等水分蒸发后反转平皿置36℃温箱培养。 （4）菌落计数 在三个平板上将周围有混浊带的黑色菌落计数。 （5）接种血平板 任选5个菌落，分别接种血平板，36℃培养24小时后进行革兰氏染色镜检。 （6）血浆凝血酶试验 步骤同增菌培养法。 （7）报告 将三个平板中疑似金黄色葡萄球菌黑色菌落数相加，乘以血浆凝血酶阳性数，除以5，再乘以稀释倍数，即可求出每克样品中金黄色葡萄球菌数。 谢谢观看 * 恍逝滔巧玩跟绣米聚锰栓朋幼甚恭势鸵界蔼泛肃清蛊气艾卫卧沾珠卯裔膏金黄葡萄球菌的检验金黄葡萄球菌的检验 踌讣厘乒炼希渺尚扳荧豢什乾戏圈傀脉适饭呕叛砸析贪谍窗烯跨叮袒湛赡金黄葡萄球菌的检验金黄葡萄球菌的检验 珠海市政府新闻办昨晚向媒体公布导致过百幼儿食物中毒的最新调