固相析出分离法 两性电解质,静电力作用,相互排斥; 形成水化膜,避免相互碰撞。 (3)盐析过程 蛋白质在水中的溶解度与离子强度的关系 Cohn经验公式: lgS = β- Ks μ S — 蛋白质溶解度,g / L; μ — 盐离子强度, μ = ? Σci Zi 2, ci — 盐离子强度,mol / L; Z i — i 离子化合价; β— 常数; Ks — 盐析常数。 Ks盐析法(溶解度剧烈下降) 在一定的pH和温度下,改变盐离子强度(浓度)进行盐析 分辨率不高 用于提取液的前期分离 β盐析法(溶解度变化缓慢) 一定的盐离子强度下,改变pH和温度进行盐析 分辨率比Ks盐析法高 用于后期分离 a、盐析作用规律 半径小的高价离子作用较强,半径大的低价离子作用较弱(感胶离子序)。 b、用盐的参考要求 盐析作用要强 较大的溶解度,受温度影响小 必须是惰性的 来源丰富、经济 c、硫酸铵特点 优点:价廉,溶解度大(767g/L),随温度变化小 缺点:水解变酸;高pH释氨,腐蚀;残留量对产品有影响。 硫酸铵使用注意事项: 1、硫酸铵中常含有少量的重金属离子,对蛋白质巯基有敏感作用,使用前用H2S处理. 2、高浓度的硫酸铵溶液一般呈酸性(PH=5.0左右),使用前也需要用氨水调节至所需PH。
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