温度和pH对酶活性的影响.ppt

实验目的 1、了解温度对酶活性的影响； 2、了解pH对酶活性的影响 实验原理 酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为 37～40℃。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到100℃，其活性并无明显改变，但在100℃的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。 酶的活力受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适pH值不同。本实验观察pH对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适pH约为6.8。 1、0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液 2、淀粉酶或稀释50～100倍的唾液 用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流入量筒并稀释50-100倍，(稀释倍数可根据各人唾液淀粉酶活性调整)混匀备用。 3、碘化钾-碘溶液 1、试管及试管架 2、恒温水浴 3、冰浴 4、沸水浴 摇匀后，将 1号、3号两试管放入37℃恒温水浴中，2号试管放入冰水中。10min后取出，将2号管内液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果。将二号管剩下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温10min后，再用碘液实验，结果如何? 管号 淀粉溶液（ml） 淀粉酶（ml） 煮沸的淀粉酶（ml） 1 1.5 1 2 1.5 1 3 1.5 1 取 3支试管，编号后按下表加入试剂: 1、温度对酶活性的影响 1. 取1个淀粉琼脂培养基，分3个区域并编号； 2. 用剪刀将滤纸剪成相同大小直径1cm以内的滤纸片3片； 3. 将滤纸片分别蘸取 盐酸溶液、蒸馏水、氢氧化钠 溶 液，放置于 淀粉培养基3个区域 4. 将淀粉培养基放置于37℃ 恒温箱培养十分钟 5. 取出淀粉培养基，加入碘液。检测不同pH下淀粉酶 活性。 2、pH对酶活性的影响 注意事项 1．加入酶液后，要充分摇匀，保证酶液与全部淀粉液接触反应，得到理想的颜色梯度变化。 2．酶和淀粉溶液混合之前要预热或预冷。