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* * * * 普通的技术无法将多种标记完全显示出来 多光谱分离技术:去除自发荧光,且可以对多种标记进行完美的分离,即使存在荧光共定位的问题 * * 由此结果同时我们可以获得如下结果 1,各靶点的形态学信息 2,各靶点的定量信息 3,各靶点的空间分布信息 4,各个靶点之间的相互关系信息(各靶点间的量、空间分布以及其他的生化信息) * * * 已经发表文章的“Journal of Molecular Diagnostics” 题目:基于量子点探针的荧光原位杂交和光谱去卷积的半自动解析法 i:传统的成像技术RGB结果 多光谱成像技术: ii:绿色荧光信号通道 Iii:红色荧光信号通道 iv:蓝色荧光信号 v:最后结果 * * * Increasing Legibility - Atypical Ductal Hyperplasia FISH 背景介绍: 非典型性导管增生的荧光原位杂交 * * * * Dual chromogen CISH assay in a Burkitt’s lymphoma line (双色素原位杂交法检测Burkitt淋巴肿瘤细胞株) Unmixed into simulated fluorescence mode(分离为模拟荧光的表达方式) Red = chrom. 8红色=染色体8 Green = chrom. 14 绿色=染色体14 Yellow or adjacent red and green = 8:14 translocation 黄色或相邻的红色或绿色=8号染色体和14号染色体易位 CISH performed using c-Myc translocation for t(8;14) on Burkitt’s lymphoma sectioned cell pellet Burkitt 淋巴肿瘤细胞株C-Myc基因 8;14染色体易位,采用双色素原位杂交法,多光谱成像技术可以很容易的进行检测。 * * * * Clinically relevant, overlapping antigens can be resolved: breast ER and PR (临床相关研究,抗原共定位的分离:乳腺癌ER和PR) 标记:DAB(PR受体),固红Fast Red:ER受体,复染剂(苏木精) * Serial sections: Generally considered as a difficult and time consuming technique Cell-to-cell comparison is complicated if tissue landmarks are difficult to match 5-7 μm sections are thicker than a lymphocyte Cutting of 1-2 μm sections requires special microtomes (expensive!) and special fixation procedures which may destroy tissue epitopes * * Be specific to say that in this case, we are showing 4 cell phenotypes, but there can be more * * * * * * Patho 2011-8-12 多光谱成像及定量分析系统在病理诊断中的初步应用 Patho 2011-8-12 CRI多光谱显微成像系统 Patho 2011-8-12 什么是多光谱成像? YFP signal Nuance 基于液晶可调谐滤光技术,可以在不同波长处检测荧光探针或染料在细胞或组织中的分布 Monochrome Color (RGB) Multispectral 420nm 490nm 720nm 多光谱分离技术:显著提高了细胞成像的信噪比 Patho 2011-8-12 两种黄色无法区分 光谱存在明显差异 多光谱的原理光谱vs颜色 Patho 2011-8-12 Covered by patents 5,953,087, 4,848,877, 5,247,378 and patents pending Lyot filter (fixed bandpass) LCTF (randomly tunable) 基于液晶可调谐滤光片 (LCTF)的多光谱成像技术 种类: 420 to 720 nm 500 to 950 nm 特征: 电子可调谐带宽滤光片 获得随机波长带宽 优质的光学质量 – 固定像素点, 无可移动部件 快速的波长调节 优质的光谱分离 Path
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