微生物鉴定中常用的生理生化实验.pptxVIP

实验九微生物鉴定中常用的生理生化实验一、实验目的1.证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。2.掌握进行微生物大分子物质水解实验的原理和方法。3.了解IMViC与硫化氢反应的原理及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。二、实验材料1.菌种枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌，普通变形杆菌，产气肠杆菌。2.培养基固体淀粉培养基，明胶培养基试管，尿素琼脂试管，醋酸铅培养基，葡萄糖蛋白胨水培养基，柠檬酸盐斜面培养基。3.溶液和试剂革兰氏染色用卢戈氏碘液，甲基红指示剂。三、实验原理1.蛋白质水解试验：微生物 对大分子物质如淀粉不能直接利用，必须依靠产生的胞外酶将大分子物质分解后，才能被微生物吸收利用。胞外酶主要为水解酶，裂解大分子为较小化合物，使其能被运输至细胞内。如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖，这过程可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实。淀粉遇碘液会产生蓝色，在细菌水解淀粉的区域，用碘液测定时不再产生蓝色，表明细菌产生淀粉酶。2.明胶液化试验：明胶是由胶原蛋白水解产生的蛋白质，在25℃以下可维持凝胶状态，以固体形式存在，而在25℃以上明胶会液化。有些微生物可产生一种称作明胶酶的胞外酶，水解这种蛋白质，而使明胶液化，甚至在4℃仍能保持液化状态。3.尿素试验：尿素是由大多数哺乳动物消化蛋白质分泌在尿液中的废物，尿素酶能分解