糖类脂质蛋白质的鉴定实验.ppt

(二)目的要求 初步学会用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。 (三)实验仪器和试剂 (1)仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试管架，试管夹，大、小烧杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，酒精灯，三角架，石棉网，火柴，研钵，石英砂，纱布，载玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸，显微镜。 (2)试剂：斐林试剂，苏丹Ⅲ染液，双缩脲试剂。 (四)方法步骤 A．还原性糖的鉴定 1．选材：本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅，或近于白色的，如苹果和梨的果实。经试验比较，颜色反应的明显程度，依次为苹果、梨、白萝卜。 2．方法步骤： (1)制备生物组织样液 (2)实验操作的方法和观察 ①向试管内注入样液2 mL 1．选材： 实验材料最好选择富含脂肪的种子，如花生种子(取其子叶)。供实验用的花生种子，必须提前浸泡3～4h。浸泡时间短了，不容易切成片；浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。 2．方法步骤： (1)制备生物组织实验材料(组织切片) (2)实验操作方法和观察 ①观察脂肪小颗粒：用显微镜观察薄片最薄处(最好一层细胞) (3)结论：该颗粒可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，它是生物组织中的脂肪物质。从而鉴定花生种子(子叶)组织中有脂肪存在。 注意：花生子叶切片切得要薄(最薄处最好是一层细胞)，因为切片较厚就观察不清脂肪颗粒。 1．选材： 选材：实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官)，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋清或新鲜肝脏研磨液(因为里面富含酶，而酶的成份主要是蛋白质)。如用大豆，必须提前浸泡1～2d，这样容易研磨成浆。有条件的话，可以直接采用现成的大豆磨成的豆浆，如果用稀释的鸡蛋清或研磨的新鲜肝脏液做实验材料，实验效果会更好。 2．方法步骤： (1)制备生物组织样液 (2)实验操作方法和观察 ①向试管内注入组织样液2 mL(或蛋白稀释液2 mL) (3)结论：组织样液加入双缩脲试剂A后，颜色变化为无色，再加双缩脲试剂B后，颜色的变化是紫色。这说明组织样液中含有蛋白质。从而鉴定黄豆组织中或者蛋白稀释液中或新鲜的肝脏中有蛋白质。 注意：做鉴定蛋白质的实验时，在鉴定之前，要留出一些黄豆组织样液，以便用来与化学试剂发生反应后的颜色作对比，增强说服力。 若不用豆浆，用蛋白稀释液或新鲜肝脏提取液做实验材料，应稀释到一定程度，如果稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的内壁上，使反应不容易彻底，并且试管不易刷干净。 3下列各项作为鉴定生物组织中还原性糖的理想材料是 (　　) A．韭菜 B．鸢尾 C．菠菜 D．梨 解析：鉴定生物组织中还原性糖的实验，最理想的实验材料是含还原糖量较高的生物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅或近于白色。因此韭菜、鸢尾、菠菜的叶片中叶绿素的含量较多，颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显，不是理想的实验材料。而只有梨符合条件。 答案：D 在用斐林试剂鉴定还原性糖时，溶液的颜色变化过程为：________→________→________。 答案：浅蓝色　棕色　砖红色(沉淀) 解析：由于斐林试剂的甲液(氢氧化钠的质量浓度为0.1 g/mL的溶液)和乙液(硫酸铜的质量浓度为0.05 g/mL的溶液)两者混合后，立即生成浅蓝色的Cu(OH)2沉淀，将蓝色的甲液和乙液的混合液(刚配制的斐林试剂)注入盛有苹果组织样液的试管中，振荡试管，溶液混合均匀，此时呈现蓝色是Cu(OH)2的颜色。当将这支试管进行水浴加热时，仔细观察会看到：溶液的颜色由开始时的浅蓝色首先变成棕色，随后又逐渐变成了砖红色沉淀。开始时的浅蓝色是Cu(OH)2的颜色；中间出现棕色是蓝色Cu(OH)2和砖红色的Cu2O混合的颜色，最后出现砖红色(沉淀)是Cu2O的颜色。 4某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片，当转动细准焦螺旋时，有一部分细胞看得清晰，另一部分细胞较模糊，这是由于 (　　) A．反光镜未调节好 B．标本切得厚薄不均 C．细调节器未调节好 D．显微镜物镜损坏 解析：有一部分细胞看得清楚，说明物镜完好无损，反光镜和细调节器也已调节好。而另一部分细胞模糊的原因可能是由于切片厚薄不均匀，厚的模糊而薄的则清楚。 答案：B 在脂肪的鉴定实验中，花生种子浸泡的时间是(　　) A．1～2 h B．3～4 h C．6～7 h D．8～9 h 答案：B 解析：实验前将供实验的花生种子浸泡的目的是容易切成完整的薄片，浸泡时间短了，不容易切成片(易碎)；浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。经实验证明适宜的浸泡时间为3～4 h。 5(2008·广东高考)双缩脲试剂可以鉴定蛋白质，是由于蛋白