1.1： DNA重组技术的基本工具.pptVIP

(1)种类： (2)作用部位： E.coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 DNA片段末端之间“形成磷酸二酯键” 2、 DNA连接酶——“分子缝合针” （黏性末端） （黏性末端和平末端） E·coli DNA连接酶 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 T4DNA连接酶 T4 DNA连接酶把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低 T4DNA连接酶 DNA聚合酶与DNA连接酶 相同 区别 DNA聚合酶 DNA连接酶 在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来 将两个DNA片段连接起来； 将DNA双链上的两个缺口同时连接起来 形成磷酸二酯键 3、载体——“分子运输车” （1）载体的作用： 将 转移到受体细胞中去。 目的基因 （2）常用的载体类型： 细菌细胞质的质粒(最常用“大肠杆菌”的质粒) λ噬菌体的衍生物 动植物病毒 外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)？ 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如氨苄青霉素抗性基因，可作为筛选重组质粒的标记基因。质粒的存在与否对受体细胞生存没有决定性作用。 质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌染色体（即拟核DNA）之外，并且具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 质粒是基因工程最常用的载体 导入 扩增 （3）作为运载体必须具备的条件 能够在受体细胞中