《洋葱核型分析实验报告》.docVIP

洋葱染色体核型分析实验报告课题名称：洋葱染色体核型分析指导教师：唐 正 义班 级：2011 级 1 班组 别：B组2小组小组成员：张 婷（044）曹 敏（045）邵 婷（046）李雪莹（047）杨 果（148）二○一四年五月二十日洋葱核型分析报告 一、引言洋葱( onion)是百合科( Liliaceae)葱属中以肉质鳞片和鳞芽构成鳞茎的2年生草本植物, 染色体数为2n= 2x= 16。每100 g鳞茎含水分88.3 g左右、蛋白质约1.8 g、碳水化合物8.0 g、维生素C 8.0mg, 并含磷、铁、钙等矿物质,几乎不含脂肪。洋葱中的有效成分可降低胆固醇,降血脂,降血压,同时还具有防癌抗衰老的功效。因此,选择洋葱为研究材料,对其进行核型分析, 为其细胞遗传学的研究奠定一定的基础。 实验目的1. 学习并掌握根尖处理、染色、压片及制片观察的方法。 2. 观察有丝分裂各时期染色体的形态变化，了解有丝分裂全过程。 3.观察分析植物细胞有丝分裂中期染色体的长短、臂比和随体等形态特征；学习染色体组型分析的方法。 三、实验原理植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，洋葱根尖分裂高峰期在上午10:00—11:00，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的。每一细胞内特定的染色体组成叫染色体组型。染色体组型分析就是研究一个物种细胞核内染色体的数目及各种染色体的形态特征，如对染色体的长度、着丝点位置、臂比、随体有无等观测，从而描述和阐明该生物的染色体组成，为细胞遗传学、分类学和进化遗传学等研究提供实验依据。 四、材料与方法 1、材料：洋葱（Aillumcepa） 2、仪器：名称：电热恒温不锈钢水浴锅 浙制0编号： 出厂号：09475名称:显微镜美国制造编号：Motic BA310药品：Carnoy固定液，无水酒精，70％酒精，酸酒精，醋酸钠，碱性品红，石碳酸，甲醛，山梨醇，0.002~0.004 mol/L 8-羟基喹啉，饱和对二氯苯水溶液，0.05-0.2% 秋水仙素，1mol/L HCl，石碳酸品红染色液。纤维素酶，果胶酶，中性树胶，香柏油，二甲苯。 五、操作步骤 1、流程：材料处理材料固定材料解离制压、镜检 2、具体步骤： (1) 将洋葱鳞茎置于盛有清水的小烧杯口上发根，待根长到1.5-2.0cm左右时备用 。 在分裂高峰期前(上午10:00—11:00)，剪下根尖，或放入冰箱 (0—4 ℃)中预处理24h。 经过预处理的根尖，再放到Carnoy液中固定24h以内。固定材料可以转入70％酒精中，在4℃冰箱中保存。　　 解离方法：从固定液中取出根尖，用蒸馏水漂洗，再放到1mol/LHCl中，在60℃水浴中恒温解离8—10min。 切取根尖分生组织放在清洁的载玻片，剥取分生组织，滴加1-2滴苯酚品红染液，染色8～12 min后加上盖玻片，覆以吸水纸压片，45%醋酸分色，中性树胶封片。镜检。 （6）核型分析 A、显微镜下镜检要求：染色体分散良好，没有重叠，数目完整，随体和着丝点明显，没有断裂，着色鲜明，形态清晰，且各条染色体处于同一平面上。　　 B、测量：依次测量放大照片各染色体长臂和短臂的长度（随体是否计入臂长须注明）。C、配对:同源染色体的剪贴配对。D、排列:染色体对从大到小依次排列。 E、剪贴: 把上述已经排列的同源染色体按先后顺序粘贴在绘图纸上。F、分类：臂比是反应着丝点在染色体上的位置。根据此可确定染色体所属的形态类型。染色体形态类型：臂比（长臂/短臂） 形态类型。 1～1.7M中着丝粒染色体；1.71～3.0SM近中着丝粒染色体；3.01～7.0 ST近端着丝粒染色体；＞7.01T端着丝粒染色体；SAT随体染色体。 六、实验结果图1 洋葱染色体显微照片（400X)图2 洋葱根尖染色体组（400X） 图3 染色体组型模式图 表1 染色体形态测量数据表 染色体序号 绝对长度（um） 相对长度（%） 臂比（长/短） 染色体类型 1 3.335 9.01 2.99 SM 2 3.835 21.1 1.21 M 3 4.18 11.30 1.46 M 4 4.305 11.645 2.20 SM 5 4.495 12.155 2.36 SM 6 5.30 13.605 2.76 SM 7 5.52 14.925 1.92 SM 8 6.275 16.965 1.36 M 总长度：36.98 um平均相对长度：13.36um 七、实验结果分析 1.核不对称系数（Ask）=长臂总长÷全组染色体总长×100%=64.45% 2.相对长度系数（I.R