第4章 免疫毒理_幻灯.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * 系统性红斑狼疮 第３节　检测免疫毒性的临床试验（clinical tests detecting immunotoxicity） 评价药物免疫毒性的分析方法 （1）免疫球蛋白浓度 （2）T细胞和B细胞浓度 （3）皮肤无变态反应性 （4）体外试验 （5）免疫抗核抗体分析 目前分层研究推荐用于免疫毒性标准化试验。 第一层，一套评价体液和细胞介导的免疫系统完整性，以及一套免疫系统病理学评价； 第二层，不考虑硬性的成套试验，而是根据第一套实验结果，有选择地进行更特异的试验。（表2） 表2 免疫毒性第一层和第二层评价内容 试验层次 检测指标 第一层 血液学，包括细胞分化抗原分类和细胞分类计数 体重和器官重量，包括脾、胸腺、肾和肝 淋巴器官组织学检查，包括脾、胸腺和淋巴结 体液免疫，测试IgM斑块－形成细胞反应 细胞介导免疫，T、B淋巴细胞对有丝分裂剂、混合 －淋巴细胞的反应性 非特异性免疫，测定NK细胞活性 第二层 血和脾中T细胞和B细胞群定量 体液免疫，测试IgM斑块－形成细胞反应 细胞介导免疫，测定T细胞活性，以及迟发过敏反应 宿主抵抗力，对病原体或肿瘤的防御能力 免疫抑制可疑时，最直接的测定全免疫系统方法：宿主抵抗力模型 用于宿主抵抗力模型的微生物和肿瘤细胞：表3 表3 用于宿主抵抗力试验免疫刺激的病原体 病原体类型 名称 典型的接触途径 病毒 巨细胞病毒 Ⅱ型单纯疱疹病毒 感冒病毒 腹腔或气管 腹腔、静脉或阴道 鼻内 细菌 小棒状杆菌 单核细胞增多性李斯特杆菌 铜绿假单胞菌 肺炎链球菌 静脉内注射 静脉内注射 静脉内注射 静脉内注射 寄生虫 疟原虫 旋毛形线虫 静脉或腹腔内注射感染血 胃内 肿瘤细胞 B16-F10黑色素瘤 PYB6纤维肉瘤 静脉内注射细胞 皮下注射细胞 免疫毒理试验中常用的方法 一、病理学常规检查 病理学检查对于评价外来化合物对免疫功能的影响十分有用。外来化合物接触实验动物后，对免疫系统的毒性作用可表现为淋巴器官重量或组织学的变化、淋巴组织及骨髓的细胞量或质的变化和外周血淋巴细胞数改变。 因此为了观察化学物质对免疫功能的影响，首先可对免疫器官进行大体解剖观察，如果发现胸腺重量下降和胸腺发生萎缩，就应着重检查细胞免疫功能；有人观察到动物接触已烯雌酚、TCDD或环磷酰胺，胸腺重量与细胞免疫功能状况呈很好的正相关。 二、淋巴细胞增殖反应试验  淋巴细胞增殖反应试验是测定T细胞和B细胞功能活性的简便方法，重复性也较好。 检测方法有形态学方法、同位素掺入法和颜色反应法。颜色反应法测定活细胞及增殖细胞转化程度简单、快速，在对一定数量细胞测定时，具有与同位素掺入法同样的灵敏度，是一种常用的方法。 三、体液免疫功能检测  有许多方法可用来检测体液免疫功能，包括抗体滴度、抗体形成细胞（PFC）及B细胞受体试验等。 抗体形成细胞试验是一种敏感而且常用的方法。通常用的抗原有绵羊红细胞（SRBC）、牛血清白蛋白（BSA）、卵白蛋白（0valbumin）、脂多糖（LPS）等。 四、细胞免疫功能检测  细胞免疫功能主要由T细胞完成，细胞免疫担负着迟发型变态反应、移植排斥、肿瘤免疫等。 用来测定细胞免疫功能的方法有体内法（迟发型变态反应、移植物抗宿主反应、皮肤移植排斥反应）和体外法（淋巴细胞增殖、T细胞毒性及淋巴因子的产生）。 五、巨噬细胞功能试验 巨噬细胞在免疫反应中具有很重要的作用，它不仅有非特异性吞噬功能，还参与细胞免疫和体液免疫。巨噬细胞有多种功能，例如吞噬作用、胞内杀伤、抗原摄取和处理、产生干扰素以及对感染细胞或恶变细胞的杀死和溶解作用等。 六、 宿主抵抗力试验 机体在接触化学物质后，可改变其对细菌、病毒、寄生虫及可移植肿瘤和自发肿瘤的抵抗力。一般认为，B细胞缺损，机体对细菌敏感性升高；T细胞缺损，则对病毒、寄生虫、肿瘤敏感性增高。这种试验是在动物身上进行的整体试验。 本章小结 一、免疫反应生物学 免疫系统 免疫应答 二、药源性免疫介导疾病 免疫抑制 超敏反应（分型、机制、生物学特点） 自身免疫 三、评价免疫功能的方法 * * * * * * * * * * * * * * * * * 体液免疫 ——B细胞活化产生特异性抗体发挥免疫效应 细胞免疫 ——特异性T细胞活化发挥免疫效应 第２节　药源性免疫介导疾病（drug-induced immune-mediated disease） 1.??反应的灵敏性 很多外来化合物对免疫系统造成不良反应的剂量往往低于它们的一般毒性作用剂量。如小鼠长期接触低剂量的甲基汞、四乙基铅和砷酸钠在表现出明显中毒反应之前，却出现免疫功能改变。又如原