微生物测定方法.pptVIP

环境微生物新技术 导师： 汇报人： 学号： P art 1 写下大标题 我所在课题组主要研究方向是：景观水体富营养化治理及水体修复与净化技术 故所关注的微生物主要与引起富营养化的藻类有关：主要研究的藻类有：铜绿微囊藻、小球藻、伪鱼腥藻、水华鱼腥藻等。 下面我就其中的来做一些说明介绍。 水华鱼腥藻 水华鱼腥藻的图片 水华鱼腥藻界 门 纲 目 科 属 种 植物界 Alage蓝藻门 Cyanophyta 蓝藻纲Cyanophyceae 念珠藻目Nostocales 念珠藻科Nostocales 鱼腥藻属 Anabaena 水华鱼腥藻 Anabaena aquae 蓝藻门蓝藻细胞无色素体和真正的细胞核等细胞器，繁殖方式常为细胞分裂。常生长在各种水体或潮湿土壤、岩石、树干及树叶上，不少种类能在干旱的环境中生长繁殖。水生类群常在含氮较高，有机质丰富的碱水体中生长。蓝藻能进行光合作用的自养型微生物，其大量生长可改变水体的理化环境，产生各种有害代谢产物，如毒素和异味物质，给公众健康带来极大隐患，同时蓝藻水华也给水产养殖业、供水及旅游业带来极大的危害。鱼腥藻属植物体为单一丝体，或不定型胶质块，或柔软膜块；藻丝等宽或末端尖、直或不规则的螺旋状弯曲；细胞球形，筒形；异形胞常为间位；孢子1个或几个成串，紧靠异形胞或位于异形胞之间。 水华鱼腥藻水华鱼腥藻在国内外发生的蓝藻水华中经常有报道。这是一种具有异形胞的丝状体蓝藻，一般不能作为鱼类饵料，有固氮的功能。 在春末、夏初、初秋时，此类藻常在湖沼、池塘大量繁殖，造成“水华”，引起水质变臭，并且可产生藻毒素，对水生生物有毒害作用，破坏水生生态系统。故可作为水体发生富营养化的指标，研究其生长特征、生态生理功能及其环境效应对解决水体富营养化有重要意义！ P art 2 写下大标题微生物主要包括原核微生物、真核微生物、病毒等三大类，由于多数微生物的个体较小，肉眼无法观察 ，对其计数一般比较困难。此外，不同环境介质中的微生物种类和特点，以及所处的环境条件不同，那么所采取的微生物数量测定方法也有所差异。对微生物计数的方法主要有三大类：总细胞计数法、活细胞计数法和微生物生长量测定法 。 一、方法概述 总细胞计数法 活细胞计数法 微生物生长量计数法 （1） 平板菌落计数法 （2） 比浊法 （3） 霉菌计数法 3.1 凯氏定氮计数法 3.2 DNA含量测定法 总细胞计数法 活细胞计数法 微生物生长量计数法 （1）血细胞计数板计数法 （2）细菌计数板计数法 （3） 膜过滤计数法 各方法的比较总结： 血细胞计数板和细菌计数板：常用于测定单细胞或孢子 ,相对比较准确； 显微镜直接计数法：不辨死活； 膜过滤：用于测定细胞浓度很低的样品 , 平板菌落计数：形成菌落的微生物，对多数微生物的测定都适用 ,相对复杂； 比浊法：相对准确 ,但需要标准曲线，不用于颜色太深的样品； 凯氏定氮法和DNA含量测定法：对微生物细胞内含量相对稳定的物质进行定量测定 , 再算出细胞的数量 ,操作相对复杂。 测定细胞总氮量或总碳量：适于浓度较高的样品 各方法的比较总结： （一）空气中空气中没有可为微生物直接利用的营养物质和足够的水分，它不是微生物生长繁殖的天然环境，因此空气中没有固定的微生物种类。它主要通过土壤尘埃、小水滴、人和动物体表的干燥脱落物、呼吸道的排泄物等方式被带入空气。由于微生物能产生各种休眠体，故可在空气中存活相当长的时期而不至死亡。空气中微生物的种类，主要为真菌和细菌。其数量则取决于所处的环境和飞扬的尘埃量。适用于空气中微生物数量测定方法主要有：1.自然沉降法（沉降平板法） 2.撞击法 3.过滤法 4.液体撞击法二、空气中微生物数量测定方法： 1.自然沉降法（沉降平板法）根据空气中携有微生物气溶胶粒子在地心引力作用下，以垂直的自然方式沉降到琼脂培养基上，经24h,37℃温箱培养计算菌落数。根据奥梅梁斯基建议，面积为100cm2的平板培养基，暴露于空气中5min,于37℃温箱培养24h后所生长的菌落数相当于10L空气中的细菌数。 空气中的细菌数（cfu/m3）=1000×{（100/A）×(5/t)×(1/10)}×N=50000N/(A×T)A----平板面积cm2；T----暴露时间min；N----平均菌落数(cfu/皿)特点：简单方便，但稳定性差，直径1~5um的粒子在5min内沉降距离有限，使小粒子采集效率低。二、空气中微生物数量测定方法 举例2.撞击法 Anderson采样器原理：多级筛孔型采样器由6个带有微细针孔的金属撞击盘构成，盘下放置有培养基的平皿，每个圆盘上有400个环形排列小孔，由上到下孔径逐渐减小。气流从顶罩进第一级，较小的粒子会由于动量