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基因工程 基础理论 和技术的发展 催生了基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切” 和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品 基因操作的工具 分子手术刀（基因的剪刀） ——限制性核酸内切酶 分子缝合针（基因的针线） ——DNA连接酶 ?分子运输车（基因的运输工具） ——运载体 （1）限制性核酸内切酶 ??? ①分布：主要在原核生物中。 ②作用特点:专一性，识别特定核苷酸序列，切割特定切点。 ?? ③结果：产生黏性未端和平末端 阅读思考 限制酶切割后有两种不同的结果，一种产生黏性末端，一种产生平末端。那么恢复它们的连接时，所用DNA连接酶是否可以不加选择？ （3）运载体??? ⒈载体需要的条件： ⑴有1~多个限制酶切点 ⑵对受体细胞无害 ⑶导入基因能在受体细胞中复制、表达 ⑷有某些标记基因，便于筛选 ⒉常用运载体： ⑴细菌的质粒 ⑵噬菌体或某些动植物病毒 种类与命名： 现在已经从约300种微生物中分离出了约4000种限制性内切酶(限制酶)。 限制酶的识别特点 * 专题1 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 基因工程诞生的理论基础 1 . DNA是遗传物质 3. 中心法则和遗传密码 2. DNA双螺旋结构 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 阅读课本第2页 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 基因工程诞生的技术突破 1. 限制性内切酶（restriction enzymes） 1970年H.O. Smith等分离出第一种限制性核酸内切酶。 Werner Arber 理论预见限制酶 Daniel Nathans 用限制酶切得SV40 DNA片断 Hamilton O. Smith 得到第一个限制酶 1978年Nobel生理或医学奖 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2. DNA连接酶（ligase） 1967年5个实验室几乎同时发现了DNA连接酶。 3. 载体（vector） 1972年前后使用小分子量的细菌质粒和?噬菌体作载体。在细菌细胞里的大量扩增。 4. 感受态体系 1970年M. Mandel和A. Higa发现经过氯化钙处理的大肠杆菌容易吸收噬菌体DNA。1972年S. Cohen发现这种处理过的细菌同样能吸收质粒DNA。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 5. 琼脂糖凝胶电泳 1960s发明了琼脂糖凝胶电泳，可将不同长度的DNA分离开。 6. DNA测序技术 1975年F. Sanger、A. Maxam和W. Gilbert发明了DNA快速测序技术。 1980年Nobel化学奖 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 基因工程的诞生 1980年Nobel化学奖 1972年斯坦福大学的Paul Berg小组完
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