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选修一知识点(按考纲顺序编排)
X1-1.DNA的粗提取与鉴定
一、实验原理
1.血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液。
2.DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。DNA在浓度为0.14 mol/L的氯化钠溶液中的溶解度最低,因此加适量蒸馏水可以使溶解在2mol/L的氯化钠溶液中的DNA析出。
3.DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
4、在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺变成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
二、实验方法与过程
1.实验材料的选取
(1)鸡血细胞做实验材料。原因:鸡血细胞核DNA含量丰富,材料易得,鸡血细胞极易吸水胀破
(2)植物细胞。因外有细胞壁,需要加洗涤剂研磨
2.过程:破碎细胞,获取DNA的滤液→去除滤液中的杂质 →提纯DNA →DNA的鉴定
X1-2.微生物的利用
一、微生物的分离和培养
1.培养基:
(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其 生长繁殖的营养基质。
(2)种类(按物理性质划分):液体培养基、固体培养基
(3)成分:不同培养基具体配方不同,一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源 (提供氮元素的物质)、无机盐。此外培养基还需要满足微生物生长对 PH、特殊营养以及 氧气的要求。
2.无菌技术:
(1)无菌技术的目的:防止培养微生物、培养器皿、培养区域被其他微生物污染和防止微生物侵入人体。 (2)消毒与灭菌的区别:
常用方法及作用对象 结果 消毒 煮沸消毒法、巴氏消毒法(牛奶等不耐高温液体的消毒)、紫外线或化学药物消毒法(接种室、接种箱、超净工作台) 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 灭菌 灼烧灭菌(接种环、接种针)、干热灭菌 (玻璃器皿)、高压蒸汽灭菌(培养基) 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子
3.微生物的纯化培养
(1)培养基制备的一般步骤:计算、 称量、 溶化 、 灭菌、 倒平板。
(2)纯化:常用的接种方法:平板划线法、稀释涂布平板法 。
二、某种微生物数量的测定
1.微生物计数方法
(1)显微镜直接计数法
①原理:利用特定细菌计数板或血球计数板,在显微镜下计算一定容积样品中的细菌数量。
②方法:用计数板计数。③缺点:不能区分死细菌和活细菌。
(2)平板菌落计数 (稀释涂布平板法、活菌计数法)
①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个 活菌 。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
三、培养基对微生物的选择作用
1.培养基(按用途分)
(1)选择培养基:培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要 的微生物的生长。
(2)鉴别培养基:根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品,鉴别不同种类的微生物。
2.土壤中分解尿素的细菌的分离
原理:土壤中的细菌之所以能够分解尿素,是因为它们体内能合成 脲酶 ,这种物质在尿素分解成无机物的过程中起催化作用。因此,配制以尿素作为唯一氮源的培养基可以筛选出分解尿素的细菌
3.分解纤维素的微生物的分离
(1)纤维素酶:是一种复合酶,一般认为至少包括三种组分,即C1酶、 Cx酶、葡萄糖苷酶,前两种酶将纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
(2)筛选原理
①刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。
②纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素,从而使菌落周围形成透明圈。
(3)筛选步骤:土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落 。选择培养的目的:增加纤维素分解菌的浓度,
四、利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用
1.与传统发酵有关的几种微生物的比较
酵母菌 醋酸菌 毛霉 乳酸菌 代谢类型 异养兼性厌氧型 异养需氧型 异养需氧型 异养厌氧型 适宜温度 20℃左右 30℃~35℃ 15℃~18℃ 室温 主要用途 酿酒 酿醋 制作腐乳 制作泡菜、酸奶 2.果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作比较
果酒和果醋的制作 腐乳的制作 泡菜的制作 原理 1.果酒:酵母菌的无氧呼吸
C6H12O6→2C2H5OH+2CO2
2.果醋:醋酸菌的有氧呼吸
①当氧气、糖源都充足时:
C6H12O6+2O2→2CH3COOH+2CO2+2H2O
②当缺少糖源时:
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