人教版高中生物选修22(阅读).pptVIP

第二节　动物细胞工程 * 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 核移植 动物细胞工程常用技术 胚胎移植 一、动物细胞培养和核移植技术 （一）动物细胞培养 1.发展历史 　　1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)在青蛙的凝固的淋巴液中成功的培养出蝌蚪的神经元细胞。 　　哈里森的实验不仅证明了动物组织体外培养的可行性，而且首创动物组织培养法。 　　我国生物学家童弟周开创了动物细胞核移植技术。 　　1975年英米尔斯坦和德科勒通过杂交瘤细胞建立了单克隆抗体技术。 　　1996年7月，英韦尔默特培育出首只克隆羊多利 2、动物细胞培养的概念 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 ４、动物细胞培养的条件 ①环境 ②营养 ③温度 ④pH ⑤气体 二氧化碳培养箱：95％空气5％CO2 无菌无毒（加抗生素） 葡萄糖、氨基酸、促生长因子、维生素 无机盐、微量元素 通常还有血清或血浆 36.5＋0.5 7.2～7.4 O2、CO2(CO2主要是维持pH) 独特之处：液体培养基；有动物血清等 ３、动物细胞培养过程 动物胚胎或幼龄动物组织、器官 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 贴壁生长 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞悬浮液 遗传物质未变 遗传物质已变 动物组织细胞间隙中含有弹性纤维 冷冻保存的细胞在10代以内，以保持正常的二倍体核型 贴壁生长 二氧化碳培养箱 接触抑制 失去接触抑制 有关概念 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。（换瓶之前） 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。（换瓶之后） 5.动物细胞培养技术的应用 1.蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 2.健康细胞培养 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 3.细胞的生理、药理、病理研究 有无脱分化 培养结果 培养目的 培养基特有成分 培养基种类 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 细胞的全能性 固体培养基 蔗糖 植物激素 植物体 快速繁殖、培育无病毒植株 细胞增殖 液体培养基 葡萄糖 动物血清 细胞株、细胞系 获得细胞或细胞分泌蛋白 有 无 ５、植物组织培养和动物细胞培养的比较 （二）动物体细胞核移植技术和克隆动物 　　动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中。使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 １、动物体细胞核移植技术 ２、激活重组细胞的方法 电脉冲刺激、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂 ２、体细胞核移植过程 克隆羊培育过程 黑面绵羊去核卵细胞 白面绵羊乳腺细胞核 细胞核移植 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植 代孕绵羊子宫 妊娠、出生 克隆羊多利 高产奶牛体细胞 普通奶牛去核卵细胞 细胞整体注入 重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植 代孕母牛子宫 妊娠、出生 高产克隆牛 克隆牛培育过程 ３、体细胞核移植技术的应用前景 在畜牧业 医药卫生 良种繁育 生物反应器制药 器官移植供体 病理研究 生长发育等理论研究 ４、体细胞核移植技术存在的问题 成功率低 技术有待改进 克隆动物健康问题 克隆动物食品安全问题 二、动物细胞融合与单克隆抗体 （一）动物细胞融合 １、定义： 动物细胞融合也称细胞杂交，是两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 ２、诱导融合的方法 仙台病毒 紫外线 丧失感染活性(不能感染细胞) 保留融合活性(诱导细胞融合) 聚乙二醇 灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布发生融合，不灭活则感染细胞，且不诱导融合。 物理法 化学法 病毒法 灭活仙台病毒、疱疹病毒、新城鸡瘟病毒 离心、振荡、电刺激 －灭活病毒诱导 细胞核 病毒颗粒 杂交细胞 有丝分裂 细胞质融合 细胞核融合 ３、融合的过程 注意：细胞融合是正常的生命活动 自然条件下的细胞融合现象 两个细胞正在融合 受精作用 ４、细胞融合技术的应用 打破种间生殖隔离的界限，在细胞学、遗传学、免疫学、肿瘤研究、生物新品种培育及制备单克隆抗体方面有广范应用。 过程 性质 应用 结果 诱导方法 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 获得杂种植株 人工条件下的过程 获得杂种植株 细胞膜的流动性 使细胞分散后诱导细胞融合 理、化方法(同左) 灭活的病毒 获得杂种细胞 正常生命活动 制备单克隆抗体 １、抗体： ２、