第5章分子发光分析法..pptVIP

分子发光分析法 基态分子吸收了一定能量后，跃迁到激发态，当激发态分子以辐射跃迁形式将其能量释放返回基态时，便产生分子发光。依据激发的模式不同，分子发光分为光致发光、热致发光、场致发光和化学发光。光致发光按激发态的类型不同又分为荧光和磷光两种。本章主要讨论分子荧光(Molecular Fluorescence)、分子磷光(Molecular Phosphorescence)化学发光分析法(Chemiluminescence) 2、荧光与分子结构的关系 ????跃迁是产生荧光的主要跃迁类型。 实验证明，对于大多数荧光物质，首先经历????或n???激发，然后经过振动弛豫或其他无辐射跃迁，再发生????或???n跃迁而得到荧光。在这两种跃迁类型中，????跃迁常能发出较强的荧光（较大的量子产率,????跃迁是产生荧光的主要跃迁类型。 ? 荧光分析法的灵敏度高 比吸光法高得多，更适合于低浓度物质的分子。 这两种方法在灵敏度方面的差别主要是由于同浓度相关的参数的测量方式不同。在光度计中，同浓度相关的参数A是I0 、It比的对数。在测低浓度液时，检测器必须能区分I0、It讯号的微小差别，故在低A时测量的精确度迅速降低。 取代基对苯的荧光影响 3.激发光谱与发射光谱的关系 三、 磷光分析仪 　磷光分析仪与荧光分析仪结构相似，也是由光源、激发单色器，液槽、发射单色器、检测器和放大显示装置所组成。 　在荧光分光光度计上配上磷光配件后，即可用于磷光测定。1、将样品放在盛有液氮的石英杜瓦瓶内，即可用于低温磷光测定。2、磷光镜的机械切光装置。 四、 应用 磷光分析主要用于测定有机化合物，如石油产品、多环芳烃、农药、药物等方面。它与荧光法互相补充，已成为痕量有机物分析的重要手段。 第三节 化学发光分析 一、概述 　　某些物质在进行化学反应时，由于吸收了反应时产生的化学能，而使反应产物分子激发至激发态，受激分子由激发态回到基态时，便发出一定波长的光。这种吸收化学能使分子发光的过程称为化学发光。利用化学发光反应而建立起来的分析方法称为化学发光分析法。化学发光也发生于生命体系，这种发光称为生物发光 (萤火虫、海洋发光生物) 。 二、基本原理 （一）化学发光的条件 　　化学发光是吸收化学反应过程产生的化学能，而使反应产物分子激发所发射的光。 A +B = C + D* D* → D + h? 反应必须满足如下条件： 　（1）化学反应必须提供足够的激发能。化学发光反应多为氧化还原反应， 　（2）化学反应有利于激发态产物的形成。 （3）激发态能释放光子或能够转移它的能量给另一个分子，而使另外的分子激发而发光。 　　化学反应发光效率?CL，又称化学发光的总量子产率。它决定于生成激发态产物分子的化学激发效率?r和激发态分子的发射效率?f。定义为： 　　　　　发射光子的分子数 　　?CL =－－－－－－－－－－ = ?r??f 　　　　　 参加反应的分子数 　　化学反应的发光效率、光辐射的能量大小以及光谱范围，完全由参加反应物质的化学反应所决定。每个化学发光反应都有其特征的化学发光光谱及不同的化学发光效率。 （二）化学发光效率和发光强度 化学发光反应的发光强度Icl以单位时间内发射的光子数表示。它与化学发光反应的速率有关，而反应速率又与反应分子浓度有关。即 Icl （t）= ?cl ? dc/dt 式中 Icl（t）表示t时刻的化学发光强度，是与分析物有关的化学发光效率dc/dt是分析物参加反应的速率。 （三）化学发光反应类型(9.26) 　 按反应体系的状态分类，如化学发光反应在气相中进行称为气相化学发光；在液相或固相中进行称为液相或固相化学发光；在两个不同相中进行则称为异相化学发光。　　 主要有O3、NO、S的化学发光反应，可用于监测空气中的O3、NO、SO2、H2S、CO、NO2等。 一氧化氮与O3的发光反应 NO + O3 → NO2* NO2* → NO2 + h? 发射的光谱范围：600～875nm，灵敏度1ng?L-1； （1）气相化学发光 乙烯与O3的发光反应 CH2O* → CH2O + h? 最大发射波长：435nm；对O3的特效反应；线性响应范围1 ng ?L-1 ～1?g ?L-1 ； （2）液相化学发光 　　用于此类化学发光分析的发光物质有鲁米诺、光泽碱洛粉碱等。例