酶工程第四章..pptVIP

2）分配效应：由于固定化酶载体的亲水性、疏水性及静电作用等引起固定化酶内部底物、其他各种效应物（H+, OH-离子，溶剂）以及产物在微环境和宏观体系之间的不等分配，从而影响酶反应速度的现象。 3）分配效应动力学 简化： ① 假定酶被均匀地固定在载体表面，且整个反应系统充分搅拌，混合均匀，排除扩散效应。 荷电载体与荷电溶质静电作用产生的分配效应常用分配系数表示 分配系数ρ= [Si]/[S] Si：代表底物和其他各种效应物在微环境中的局部浓度 S：代表底物和其他各种效应物在宏观体系中的总体浓度 根据Boltzmann分配定律，荷电溶质在 荷电载体微环境与外部溶液的分配服从分配系数可表示为： [Si]= ρ[S] ?ρ=exp[-ZeΦ/(KBT)] 其中，Ze荷电溶质的电荷，Φ荷电载体产生的静电位，KB为Boltzmann 常数，T 绝对温度 对固定化酶催化反应，分配效应仅影响底物浓度分布，酶的动力学方程仍可用米氏方程表示。 ?V=Vm [Si] /(Km+ [Si]) = Vm [S]ρ/(Km+[S]ρ) = Vm [S]/(Kappm +[S]) ?其中Kappm=Km/ρ 上式表明，分配效应造成的影响是改变Km。 ρ= [Si]/[S] Kappm=Km/ρ （1）当载体与底物电荷相同时， [Si]＜[S]，ρ＜1， Kappm＞ Km （2）当载体与底物电荷相反时， [