5.3血红白的提取和分离.docVIP

课　　题 血红蛋白的提取和分离 备课时间 上课时间 总课时数 课程目标 知识与 技能 1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白 2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理 过程与 方法 体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求，注意按照操作提示进行相关步骤 情感态度与价值观 初步形成科学的思维方式，发展科学素养和人文精神 教学重点 凝胶色谱法的原理和方法 教学难点 样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填 教学过程 二次备课 一、情境导入 蛋白质是生命活动的主要承担者，是细胞内含量最高的有机化和物。对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。怎样提取蛋白质呢？ 二、授新课 1．基础知识 蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。 1．1凝胶色谱法（分配色谱法）： （1）原理：（图5－13a）分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。 （2）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。 （3）分离过程：（图5－13b） 混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子 ＊洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。 1．2缓冲溶液