液相色谱法测定混合物中三元组分.docVIP

液相色谱法测定混合物中萘、联苯、菲 实验目的 巩固色谱分析的原理 掌握液相色谱的分析原理及过程 了解LC 5500高效液相色谱仪的基本结构和工作原理 掌握LC 5500高效液相色谱仪的基本操作步骤 掌握HPLC定性、定量（外标）分析的方法 实验原理 根据混合物中萘、联苯和菲在固定相与流动相间分配性质的不同，进行分离。本次实验采用ODS-C18色谱柱，以甲醇为流动相，检测器采用紫外分光（UV）检测器，检测波长为254nm。 仪器与试剂 仪器： LC5500液相色谱仪 1台 KQ-50B超声波清洗器 1台 AP-01P真空泵 1台 过滤装置 1套 微量注射器 50μL 1支 容量瓶 50mL 7只 药品： 甲醇（G.R.）、萘（G.R.）、联苯（G.R.）、菲（G.R.）、苯（G.R.）、丙酮（G.R.） 实验步骤 流动相的准备 流动相的选择 根据待分离组分性质，选择适当的流动相。本次实验采用无水甲醇作流动相。 流动相的配制 本次实验采用无水甲醇为流动相，故流动相无需配制。 流动相的过滤 选用0.45μm的有机相过滤膜，安装抽滤装置，过滤试剂甲醇。 流动相的脱气 将盛有过滤好甲醇的试剂瓶放于超声波清洗器中，进行脱气处理。视试液总量，脱气时间控制在15~30min。 仪器的准备 更换流动相 排除气泡 开启主机、高压泵电源 进行“梯度淋洗” 调整高压泵显示窗口为仪器工作状态